Navegação IPEN por Autores IPEN "AFFONSO, R."

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  • IPEN-DOC 06128

    DALMORA, S.; OLIVEIRA, J.E. ; AFFONSO, R. ; GIMBO VIANNA, E.K.; RIBELA, M.T.C.P. ; BARTOLINI, P. . Analysis of recombinant human growth hormone directly in osmotic shock fluids. Journal Chromatography, v. 782, A, p. 199-210, 1997.

    Palavras-Chave: sth; high-performance liquid chromatography; secretion; escherichia coli; fermentation; radioimmunoassay; recombinant dna; proteins; iodine 125

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  • IPEN-DOC 07724

    AFFONSO, R. ; RIBELA, M.T.C.P. ; ARKATEN, R.R. ; MARUMO, M.H.B. ; BARTOLINI, P. . Bacterial expression and purification of a cytoplasmic form of human prolactin: a study on the utilization of different vector elements. In: REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 28., 22-25 maio, 1999, Caxambu, MG. Resumos... 1999.

    Palavras-Chave: lth; biosynthesis; escherichia coli; cytoplasm; genes; gene regulation; ribosomes; transcription

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  • IPEN-DOC 19732

    PEREIRA, L.M.; SILVA, S.F. ; SARAIVA, K.W.; ELIAS, C.C.; ALVES, M.M.; PEREIRA, V.S.; AFFONSO, R. . Characterization of recombinant full-length human protein RPL-10. In: REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 40., 19-22 de maio, 2012, Foz do Iguacu, PR. Resumos... 2012.

    Palavras-Chave: proteins; ribosomes; tumor cells; inhibition; inclusions; dichroism; fluorescence

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  • IPEN-DOC 18649

    SILVA, S.F. ; PEREIRA, L.M.; SARAIVA, K.W.; CHARRO, S.G.; AFFONSO, R. . Cloning, expression, purification and structural evaluation of the jun oncoprotein. In: REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 40., 19-22 de maio, 2012, Foz do Iguacu, PR. Resumos... 2012.

    Palavras-Chave: proteins; leucine; tumor cells; inhibition; dna; cloning; escherichia coli; amino acids; dichroism

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  • IPEN-DOC 19733

    SILVA, S.F. ; ELIAS, C.C.; ALVES, M.M.; SARAIVA, K.W.; SANTOS, G.S.; AFFONSO, R. . Cloning, expression, purification and structural evaluation of the region of AP1 jun oncoprotein. In: REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 40., 19-22 de maio, 2012, Foz do Iguacu, PR. Resumos... 2012.

    Palavras-Chave: proteins; leucine; tumor cells; dna; cloning; escherichia coli; amino acids; dichroism

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  • IPEN-DOC 26765

    SUZUKI, M.F. ; ALMEIDA, L.A. ; POMIN, S.A. ; SILVA, F.D. ; FREIRE, R.P. ; OLIVEIRA, J.E. ; AFFONSO, R. ; BARTOLINI, P. ; SOARES, C.R.J. . Expression of the human prolactin antagonist delta 1-11 G129R-PRL in E. coli periplasm. In: SANTOS, NATHALIA V. dos (Ed.) BIOPARTITIONING & PURIFICATION CONFERENCE, November 11-13, 2019, Guarujá, SP. Abstract... São Paulo, SP: Sociedade Brasileira de Microbiologia, 2019. p. 110-110.

    Abstract: Recombinant human prolactin antagonist delta 1-11 G129R-hPRL is a 21.9 kDa protein with 188 amino acids that downregulates the proliferation of a variety of cells expressing prolactin receptors. Periplasmic expression of recombinant proteins in E. coli has been considered an option for obtaining an authentic, soluble, and correctly folded protein, as an alternative to the cytoplasmic production in inclusion bodies of an unfolded, insoluble protein, carrying an extra initial methionine. The aim of this work was to carry out the expression of delta 1-11 G129R-hPRL antagonist in the periplasm of E. coli, testing different temperatures. E. coli BL21(DE) strain, transformed with a plasmid based on a pET25b(+) vector, DsbA signal peptide and delta 1-11 G129R-hPRL cDNA, was cultured in LB medium with ampicillin addition. After overnight culture at 30 °C, 0.6 mM IPTG was added and five different temperatures were applied: 25, 30, 32, 35 and 37 °C. Periplasmic fluid was extracted after 5 hours by osmotic shock. The samples were analyzed by SDS-PAGE, Western blotting and RP-HPLC. The best condition was increasing the temperature to 35 °C for 5 h, after having reached the late log phase. The specific expression of 0.14 ± 0.02 μg/mL/A600, with a final optical density of 3.43 ± 0.13 A600 (n = 3) was obtained. Purification by nickel affinity chromatography (Hisprep FF) with Imidazole elution followed by size exclusion chromatography (Sephacryl S-100) was carried out connected to an ÄKTA purification system. Quantification was carried out by comparison between the areas under the curve observed in the HPSEC chromatogram, for the unknown samples versus the Internal Standard of rec-hPRL. The final product showed >95% purity by HPSEC analysis. The delta 1-11 G129R-hPRL antagonist was expressed and purified for further in vivo and in vitro tests, in view of clinical applications for inhibiting cancer cell proliferation that overexpresses prolactin receptor and studies related to prolactin function in anterior pituitary.

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  • IPEN-DOC 04689

    BELLINI, M.H. ; BIANCO, A.C.; MATHOR, M.B. ; AFFONSO, R. ; BARTOLINI, P. . Expression of the uncoupling protein (UCP) from rat brown adipose tissue by transplatable human epidermal cells. In: 8o. ENCONTRO NACIONAL DE VIROLOGIA, 24-27 de novembro, 1996, Sao Lourenco, MG. Abstract... 1996.

    Palavras-Chave: epidermis; adipose tissue; proteins; animal cells

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  • IPEN-DOC 22462

    ELIAS, C.C. ; PEREIRA, L.M. ; SANTANA, F. ; SAMPAIO, S.B.; ARAGAO, D.S.; CASARINI, D.E.; AFFONSO, R. . Expression, characterization and enzymatic activity of the C-catalytic site of the angiotensin-converting enzyme I. In: CONGRESS OF THE INTERNATIONAL UNION FOR BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY, 23th; ANNUAL MEETING OF THE BRAZILIAN SOCIETY FOR BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY, 44th, August 24-28, 2015, Foz do Iguaçu, PR. Abstract... 2015.

    Palavras-Chave: angiotensin; enzymes; membranes; purification; polymerase chain reaction; enzyme activity; molecular biology

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  • IPEN-DOC 18651

    LARISSA, M.P.; AFFONSO, R. ; REIS, R.I.; CASARINI, D.E.. Functional evaluation Of angiotensin-converting enzyme (ACE) changes through site-directed mutation. In: REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 40., 19-22 de maio, 2012, Foz do Iguacu, PR. Resumos... 2012.

    Palavras-Chave: angiotensin; enzymes; amino acids; mutations; hypertension

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  • IPEN-DOC 07726

    MARUMO, M.H.B. ; PERONI, C.N. ; AFFONSO, R. ; BARTOLINI, P. . High-level expression of human growth hormone (hGH) in transduced primary human keratinocytes. In: REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 28., 22-25 maio, 1999, Caxambu, MG. Resumos... 1999.

    Palavras-Chave: sth; keratin; animal cells; clone cells; radioimmunoassay

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  • IPEN-DOC 13851

    CHURA-CHAMBI, R.M.; AFFONSO, R. ; GENOVA, L. ; MORGANTI, L. . High-pressure refolding of aggregated fusion proteins: endostatin-proapoptotic peptides with enhanced antiangiogenic activity. In: CONFERENCE ON RECOMBINANT PROTEIN PRODUCTION, 5th, September 24-28, 2008, Alghero, Italy. Abstract... 2008. p. 141.

    Palavras-Chave: proteins; collagen; gene recombination; endothelium; peptides; apoptosis; hydrostatics; pressure dependence

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  • IPEN-DOC 07347

    OLIVEIRA, J.E. ; SOARES, C.R.J. ; PERONI, C.N. ; VIANNA, E.K.G.; CAMARGO, I.M.C. ; MORGANTI, L. ; BELLINI, M.H. ; AFFONSO, R. ; ARKATEN, R.R. ; BARTOLINI, P. ; RIBELA, M.T.C.P. . High-yield purification of biosynthetic human growth hormone secreted in Escherichia coli periplasmic space. Journal Chromatography, A, v. 852, n. 2, p. 441-450, 1999.

    Palavras-Chave: sth; biosynthesis; escherichia coli; proteins; precipitation; chromatography

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  • IPEN-DOC 06990

    SOARES, C.R.J. ; PERONI, C.N. ; MORGANTI, L. ; AFFONSO, R. ; ARKATEN, R.R. ; SOUZA, J.M.; BARTOLINI, P. . Hollow fiber bioreactors for hormone production in CHO cells. In: REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 29., 27-30 maio, 2000, Caxambu, MG. Resumos... 2000. p. 65.

    Palavras-Chave: hormones; biosynthesis; bioreactors; lth; tsh; cho cells

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  • IPEN-DOC 05877

    SOARES, C.R.J. ; OLIVEIRA, J.E. ; MORGANTI, L. ; BELLINI, M.H. ; RIBELA, M.T.C.P. ; BARTOLINI, P. ; AFFONSO, R. ; ARKATEN, R. ; DALMORA, S.; MURATA, Y. . Physicochemical immunological and biological characterization of recombinant human growth hormone. In: 24a. REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 6-9 de maio, 1995, Caxambu, MG. Abstract... 1995. p. 108.

    Palavras-Chave: sth; recombination; physical chemistry; immunology; bioassay

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  • IPEN-DOC 01846

    MORGANTI, L. ; AFFONSO, R. ; BARTOLINI, P. . Production and caracterization of biologically active GHIS-ILEGLU-GLY-human prolactin, secreted in the periplastic space of Escherichia coli. In: 24a. REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, May 6-9, 1995, Caxambu, MG. Abstract... 1995. p. 97.

    Palavras-Chave: lth; escherichia coli; secretion; chromatography

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  • IPEN-DOC 04696

    MORGANTI, L. ; AFFONSO, R. ; SOARES, C.R.J. ; BARTOLINI, P. . Production and characterization of authentic human prolactin (hPRL) secreted in the periplasmic space of Escherichia coli. In: 25a. REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 4-7 de maio, 1996, Caxambu, MG. Abstract... 1996. p. G39.

    Palavras-Chave: lth; escherichia coli; mutagenesis; bioassay

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  • IPEN-DOC 06346

    DALMORA, S.; OLIVEIRA, J.E. ; AFFONSO, R. ; RIBELA, M.T.C.P. ; ARKATEN, R.R. ; BARTOLINI, P. . Quality control of recombinant human growth hormone directly in osmotic shock fluids. In: 26a. REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 3-6 de maio, 1997, Caxambu, MG. Abstract... 1997.

    Palavras-Chave: high-performance liquid chromatography; sth; secretion; gene recombination; bacteria; fermentation; radioimmunoassay; quality control

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  • IPEN-DOC 07733

    FIGUEIREDO, J.O.; BELLAVER, L.H.; SOARES, C.R.J. ; AFFONSO, R. ; BARTOLINI, P. . Rec-hPRL production in E.coli periplasmic space with the use of a temperature sensible promoter. In: REUNIAO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOQUIMICA E BIOLOGIA MOLECULAR, 30., 19-22 maio, 2001, Caxambu, MG. Resumos... 2001. p. 100.

    Palavras-Chave: lth; escherichia coli; gene regulation

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  • IPEN-DOC 04693

    BARTOLINI, P. ; ARKATEN, R. ; AFFONSO, R. ; BELLINI, M.H. ; DALMORA, S.; GIMBO VIANNA, E.K. ; MORGANTI, L. ; OLIVEIRA, J.E. ; PERONI, C.N. ; RIBELA, M.T.C.P. ; SOARES, C.R.J. . Recombinant human growth hormone. Production and quality control. In: 22o. CONGRESSO BRASILEIRO DE ENDOCRINOLOGIA E METABOLOGIA, 17-21 de novembro, 1996, Salvador, BA. Abstract... 1996. p. 217.

    Palavras-Chave: sth; recombinant dna; radioimmunoassay; production; quality control

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  • IPEN-DOC 06087

    PERONI, C.N. ; AFFONSO, R. ; BARTOLINI, P. ; BELLINI, M.H. ; MORGANTI, L. ; MURATA, Y. . Recombinant human thyrotropin (REC-hTSH). Development of a biotecnology product for diagnostic and therapeutic use. In: 14o. CONGRESO DE LA ASOCIACION LATINOAMERICANA DE SOCIEDADES DE BIOLOGIA Y MEDICINA NUCLEAR, 9-13 de octubre, 1995, Salvador, BA. Abstract... 1995. p. 343.

    Palavras-Chave: tsh; recombinant dna; iodine 131; diagnosis; therapy; thyroid; carcinomas

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Autor: Maprelian

Título: loss of coolant

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2. A experiência do Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN-CNEN/SP) na criação de um Repositório Digital Institucional – RDI, clique aqui.