FRAGA, TATIANA R.; CHURA-CHAMBI, ROSA M.; GONCALEZ, AMANE P.; MORAIS, ZENAIDE M.; VASCONCELLOS, SILVIO A.; MORGANTI, LIGIA; MARTINS, ELIZABETH A.L.. Refolding on the recombinant protein OmpA70 from Leptospira interrogans from inclusion bodies using high hydrostatic pressure and partial characterization of its immunological properties. Journal of Biotechnology, v. 148, n. 2-3,
p. 156-162, 2010.
CHURA-CHAMBI, ROSA M.; NAKAJIMA, ERIKA; CARVALHO, ROBERTA R. de; MIYASATO, PATRICIA A.; OLIVEIRA, SÉRGIO C.; MORGANTI, LIGIA; MARTINS, ELIZABETH A.L.. Refolding of the recombinant protein Sm29, a step toward the production of the vaccine candidate against schistosomiases. Journal of Biotechnology, v. 168, p. 511-519, 2013.
GENNARI, S.M.; ABDALLA, A.L.. Aplicacao experimental de uma vacina irradiada contra o dictyocaulus viviparus. Pesquisa Agropecuaria Brasileira, v. 18, n. 3,
p. 287-293, 1983.
GENNARI, S.M.; DUNCAN, J.L.. Vacina brasileira irradiada, comparada com a britanica 'Dictol', no combate ao dictyocaulus viviparus. Pesquisa Agropecuaria Brasileira, v. 18, n. 8,
p. 911-917, 1983.
SARTORI, GISELLE P.; COSTA, ANDREA; MACARINI, FERNANDA L.S.; MARIANO, DOUGLAS O.C.; PIMENTA, DANIEL C.; SPENCER, PATRICK J.; GALISTEO JUNIOR, ANDRES J.. Characterization and evaluation of the enzymatic activity of tetanus toxin submitted to gamma radiation by Cobalt 60. In: INTERNATIONAL NUCLEAR ATLANTIC CONFERENCE, October 21-25, 2019, Santos, SP. Proceedings... Rio de Janeiro: Associação Brasileira de Energia Nuclear, 2019. p. 2191-2203.Abstract: Tetanus is a neurological disease which blocks the inhibitory neurotransmitters liberation. Also treatment does not cure the disease, and its main form of prevention is through vaccination. The vaccine is produced by the inactivation of tetanic toxin (TeNT) with formaldehyde, which may cause side effects. An alternative way is the use of ionizing radiation for inactivation of the toxin and also to improve the potential immunogenic response and to reduce the pos-vaccination side effects. Therefore, the aim of this study was to characterize the TeNT structure after different doses of ionizing radiation of Cobalt 60, and also to assess the enzymatic activity after the radiation. SDS PAGE and MALDI-TOF analysis revealed gradual modification on the TeNT structure according to doses increase. Also, fragmentation and possible aggregations of the protein fragments were observed in higher doses. In the analysis of peptide preservation by enzymatic digestion and mass spectrometry, there was a slight modification in the recognition up to the dose of 4 kGy at subsequent doses, recognition was minimal. The analysis of the enzymatic activity by fluorescence showed a 35 % attenuation in the activity even at higher doses. In the antigenic evaluation performed by ELISA and Western Blot, anti-TeNT antibodies were detected against the irradiated toxins at the different doses, with a gradual decrease as the dose increased, but remaining at satisfactory levels, indicating the possibility of possible use as an immunogen, however, studies of enzymatic activity on higher should be further analyzed.
COSTA, ANDREA da; ZORGI, NAHIARA E.; NASCIMENTO, NANCI do; GALISTEO JUNIOR, ANDRES J.; ANDRADE JUNIOR, HEITOR F. de. Gamma irradiation of Toxoplasma gondii protein extract improve immune response and protection in mice models. Biomedicine & Pharmacotherapy, v. 106, p. 599-604, 2018.
DOI:
10.1016/j.biopha.2018.06.155
Abstract: Gamma radiation induces protein changes that enhance immunogenicity for venoms, used in antivenin production.
Coccidian parasites exposed to gamma radiation elicit immune response with protection in mice and
man, but without studies on the effect of gamma radiation in soluble acellular extracts or isolated proteins.
Toxoplasmosis is a highly prevalent coccidian disease with only one vaccine for veterinary use but with remaining
tissue cysts. Total parasite extracts or recombinant proteins used as immunogen induce usually low
protection. Here, we study gamma radiation effect on T. gondii extracts proteins (STAG) and its induced immunity
in experimental mice models. By SDS-PAGE, protein degradation is seen at high radiation doses, but at
ideal dose (1500 Gy), there are preservation of the antigenicity and immunogenicity, detected by specific antibody
recognition or production after mice immunization. Immunization with STAG irradiated at 1500 Gy induced
significant protection in mice immunized and challenged with distinct T. gondii strains. In their blood,
higher levels of specific CD19+, CD3+CD4+ and CD3+CD8+ activated cells were found when compared to mice
immunized with STAG. Irradiated T. gondii tachyzoites extracts induce immune response and protection in mice
in addition, could be a feasible alternative for Toxoplasma vaccine.
HIRAMOTO, R.M.; ALMEIDA, B.S.V.; CARDOSO, R.P.A.; ANDRADE JUNIOR, H.F.. Toxoplasma gondii: Effects of sup(60)Co ionizing radiation in the viability and infectivity, detected in vitro in LLC-MK2 cells and in vivo in C57BL/6j mice. In: 4th MEETING ON NUCLEAR APPLICATIONS, ENCONTRO NACIONAL DE APLICACOES NUCLEARES, August 18-22, 1997, Pocos de Caldas, MG.
1997. p. 957-960.
SARTORI, GISELLE P.; COSTA, ANDREA da; MACARINI, FERNANDO L. dos S.; MARIANO, DOUGLAS O.C.; PIMENTA, DANIEL C.; SPENCER, PATRICK J.; NALI, LUIZ H. da S.; GALISTEO JUNIOR, ANDRES J.. Characterization and evaluation of the enzymatic activity of tetanus toxin submitted to cobalt-60 gamma radiation. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 27, p. 1-13, 2021.
DOI:
10.1590/1678-9199-JVATITD-2020-0140
Abstract: Background Tetanus toxin blocks the release of the inhibitory neurotransmitters in the central nervous system and causes tetanus and its main form of prevention is through vaccination. The vaccine is produced by inactivation of tetanus toxin with formaldehyde, which may cause side effects. An alternative way is the use of ionizing radiation for inactivation of the toxin and also to improve the potential immunogenic response and to reduce the post-vaccination side effects. Therefore, the aim of this study was to characterize the tetanus toxin structure after different doses of ionizing radiation of 60Co. Methods Irradiated and native tetanus toxin was characterized by SDS PAGE in reducing and non-reducing conditions and MALD-TOF. Enzymatic activity was measured by FRET substrate. Also, antigenic properties were assessed by ELISA and Western Blot data. Results Characterization analysis revealed gradual modification on the tetanus toxin structure according to doses increase. Also, fragmentation and possible aggregations of the protein fragments were observed in higher doses. In the analysis of peptide preservation by enzymatic digestion and mass spectrometry, there was a slight modification in the identification up to the dose of 4 kGy. At subsequent doses, peptide identification was minimal. The analysis of the enzymatic activity by fluorescence showed 35 % attenuation in the activity even at higher doses. In the antigenic evaluation, anti-tetanus toxin antibodies were detected against the irradiated toxins at the different doses, with a gradual decrease as the dose increased, but remaining at satisfactory levels. Conclusion Ionizing radiation promoted structural changes in the tetanus toxin such as fragmentation and/or aggregation and attenuation of enzymatic activity as the dose increased, but antigenic recognition of the toxin remained at good levels indicating its possible use as an immunogen. However, studies of enzymatic activity of tetanus toxin irradiated with doses above 8 kGy should be further analyzed.
GALISTEO JUNIOR, ANDRES J.. Toxoplasma gondii vs radiacao ionizante: imunidade humoral e celular em baço e intestino de camundongos isogênicos imunizados com taquizoítos irradiados por cobalto 60 / Toxoplasma gondii vs ionizing radiation: Cell and humoral immunity in spleen and gut of isogenic mice immunized with 60Co irradiated tachyzoites. 2008. Tese (Doutoramento) - Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP, São Paulo. 124 p.Orientador: Heitor Franco de Andrade Junior.
DOI:
10.11606/T.85.2008.tde-17082009-173434
Abstract: Toxoplasma gondii vs radiação ionizante: Imunidade humoral e celular em baço e intestino de camundongos isogênicos imunizados com taquizoítos irradiados por Cobalto 60 Andrés Jimenez Galisteo Jr. Estudamos o desenvolvimento de uma vacina para toxoplasmose utilizando a radiação ionizante como ferramenta. Aqui avaliamos o desenvolvimento da imunidade sistêmica e intestinal e a resistência à infecção, em diferentes camundongos imunizados, por via oral e parenteral, com taquizoítos irradiados a 255 Gy e desafiados com cistos da cepa ME49. Camundongos C57Bl/6j, BALB/c e C57Bl/6j IFN--/- foram imunizados com 107 taquizoitos de T. gondii irradiados a 255Gy por diferentes vias. As preparações de taquizoítos irradiados, por via oral e parenteral, induziram produção de imunoglobulinas IgG e IgA no soro de camundongos, sendo predominante a subclasse de IgG2b, determinadas por ELISA. A produção de IgM foi mínima. Os animais imunizados pela via parenteral, apresentaram uma maturação mais rápida da avidez de anticorpos IgG que os animais imunizados por via oral. Houve excreção de IgG, IgA e IgM nas fezes dos animais imunizados, mais intensa nos animais imunizados por via oral. No estudo da imunidade celular induzida por antígeno e detectada for real-time PCR, houve uma grande produção de IFN- por células esplênicas, menor por células das placas de Peyer intestinais, onde houve maior produção de IL-2. Houve proteção em todos os nossos esquemas avaliados, maior nos animais BALB/c. Os animais deficientes de IFN-, não foram afetados pelo processo de imunização e apresentaram produção de IgG e IgA sérico e excreção de S-IgA e S-IgM nas fezes, com menor numero de cistos cerebrais em animais imunizados por via parenteral. Todos nossos dados apontam para a possibilidade do desenvolvimento de uma vacina oral para toxoplasmose, utilizando taquizoítos irradiados, com aplicação prática na imunização de felinos domésticos e selvagens.
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O gerenciamento do Repositório está a cargo da Biblioteca do IPEN. Constam neste RI, até o presente momento 20.950 itens que tanto podem ser artigos de periódicos ou de eventos nacionais e internacionais, dissertações e teses, livros, capítulo de livros e relatórios técnicos. Para participar do RI-IPEN é necessário que pelo menos um dos autores tenha vínculo acadêmico ou funcional com o Instituto. Nesta primeira etapa de funcionamento do RI, a coleta das publicações é realizada periodicamente pela equipe da Biblioteca do IPEN, extraindo os dados das bases internacionais tais como a Web of Science, Scopus, INIS, SciElo além de verificar o Currículo Lattes. O RI-IPEN apresenta também um aspecto inovador no seu funcionamento. Por meio de metadados específicos ele está vinculado ao sistema de gerenciamento das atividades do Plano Diretor anual do IPEN (SIGEPI). Com o objetivo de fornecer dados numéricos para a elaboração dos indicadores da Produção Cientifica Institucional, disponibiliza uma tabela estatística registrando em tempo real a inserção de novos itens. Foi criado um metadado que contém um número único para cada integrante da comunidade científica do IPEN. Esse metadado se transformou em um filtro que ao ser acionado apresenta todos os trabalhos de um determinado autor independente das variáveis na forma de citação do seu nome.
A elaboração do projeto do RI do IPEN foi iniciado em novembro de 2013, colocado em operação interna em julho de 2014 e disponibilizado na Internet em junho de 2015. Utiliza o software livre Dspace, desenvolvido pelo Massachusetts Institute of Technology (MIT). Para descrição dos metadados adota o padrão Dublin Core. É compatível com o Protocolo de Arquivos Abertos (OAI) permitindo interoperabilidade com repositórios de âmbito nacional e internacional.
1. Portaria IPEN-CNEN/SP nº 387, que estabeleceu os princípios que nortearam a criação do RDI,
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2. A experiência do Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN-CNEN/SP) na criação de um Repositório Digital Institucional – RDI,
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O Repositório Digital do IPEN é um equipamento institucional de acesso aberto, criado com o objetivo de reunir, preservar, disponibilizar e conferir maior visibilidade à Produção Científica publicada pelo Instituto, desde sua criação em 1956.
Operando, inicialmente como uma base de dados referencial o Repositório foi disponibilizado na atual plataforma, em junho de 2015. No Repositório está disponível o acesso ao conteúdo digital de artigos de periódicos, eventos, nacionais e internacionais, livros, capítulos, dissertações, teses e relatórios técnicos.
A elaboração do projeto do RI do IPEN foi iniciado em novembro de 2013, colocado em operação interna em julho de 2014 e disponibilizado na Internet em junho de 2015. Utiliza o software livre Dspace, desenvolvido pelo Massachusetts Institute of Technology (MIT). Para descrição dos metadados adota o padrão Dublin Core. É compatível com o Protocolo de Arquivos Abertos (OAI) permitindo interoperabilidade com repositórios de âmbito nacional e internacional.
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