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IPEN-DOC 14085
- MAROTTI, JULIANA
;- ARANHA, ANA C.C.
;- EDUARDO, CARLOS de P.
;- RIBEIRO, MARTHA S.
. Photodynamic therapy can be effective as a treatment for herpes simplex labialis.
Photomedicine and Laser Surgery,
v. 27,
n. 2,
p. 357-363,
2009.
Palavras-Chave: herpes simplex; infectious diseases; viral diseases; laser radiation; photosensitivity; therapy
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IPEN-DOC 13802
- COUTO, RENATA M.
.
Desenvolvimento de radiofarmaco para radiosinovectomia
/ Development of radiopharmaceutical for radiosinovectomy
.
2009.
Dissertacao (Mestrado) -
Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP,
Sao Paulo.
102 p.
Orientador: Elaine Bortoleti de Araujo.
DOI:
10.11606/D.85.2009.tde-29062009-155807
Abstract: Radiofármacos marcados com diferentes radionuclídeos são utilizados em aplicações diagnósticas e terapêuticas em Medicina Nuclear. Nos últimos anos houve um aumento no interesse pela terapia radionuclídica, com a introdução de novos radiofármacos aplicados para destruir especificamente determinada célula ou impedir sua proliferação indesejável. Uma modalidade terapêutica que emprega radiofármacos é a radiosinovectomia (RSV), na qual o radiofármaco é administrado na cavidade articular, sendo uma alternativa de tratamento existente para artropatia de várias etiologias e, em particular, àquelas associadas à artrite reumatóide e à hemofilia. O presente trabalho objetivou estudar a marcação de compostos com 90Y e 177Lu visando otimizar as condições de produção e controle de qualidade de pureza radioquímica, avaliar a estabilidade dos produtos gerados e realizar estudos preliminares de biodistribuição animal de radiofármacos com potencial para aplicação em radiosinovectomia. O estudo da produção do citrato coloidal de 90Y (Cit-90Y) foi baseado em procedimento de marcação utilizando solução de 90YCl3 (37 - 54 MBq) levada previamente à secura, seguida da adição de solução de nitrato de ítrio, e citrato de sódio em pH 7,0 com aquecimento à 37º C por 30 minutos. A produção de hidroxiapatita (HA) marcada com 90Y foi estudada tendo como base procedimento de marcação utilizando ácido cítrico monohidratado, nitrato de ítrio e a solução de 90YCl3 (37 - 370MBq). Incubou-se a mistura durante 30 minutos à temperatura ambiente e adicionou-se a hidroxiapatita em meio aquoso e incubou-se à temperatura ambiente durante 30 minutos sob forte agitação. Na produção de HA-177Lu, utilizou-se solução de 177LuCl3 (296 MBq), em presença de óxido de lutécio em meio de NaCl 0,9% pH 7, sob agitação contínua à temperatura ambiente durante 30 minutos. Diversos parâmetros de reação foram estudados para os três radiofármacos. O rendimento das marcações foi determinado por meio de centrifugação após lavagem das partículas com NaCl 0,9%. A análise de pureza radioquímica das marcações foi realizada por meio de cromatografia líquida ascendente utilizando diferentes sistemas cromatográficos. A análise do tamanho das partículas radiomarcadas foi realizada utilizando-se membranas filtrantes de poros de diferentes tamanhos. O comportamento biológico da HA-90Y e HA-177Lu foi estudado a partir da administração intra-articular (joelho) de 18,5 22,2 MBq /0,1 mL do respectivo radiofármaco. Foram adquiridas imagens cintilográficas em gama-câmara em diferentes tempos para determinar a retenção e o extravasamento da atividade da articulação. O método utilizado para produção do Cit-90Y resultou em baixo rendimento de marcação (cerca de 20%), com baixa porcentagem de atividade ligada às partículas com tamanho apropriado para aplicação em RSV. Apesar do baixo rendimento de marcação, as partículas radiomarcadas separadas por centrifugação apresentaram estabilidade relativa de cerca de 70% após 5 dias. A marcação da HA-90Y resultou em excelentes rendimentos de marcação (> 95%). A reação foi otimizada para aplicação rotineira com a redução do tempo de reação para 15 minutos e utilização de apenas um procedimento de centrifugação e lavagem. A marcação da HA com 177Lu resultou em excelente rendimento (> 95%), com otimização da % de ligação às partículas >12m, sendo que os melhores resultados foram obtidos nas marcações realizadas na ausência de óxido de lutécio. A HA marcada com 90Y e 177Lu apresentaram estabilidade in vitro, armazenado à temperatura ambiente dentro do período avaliado de 5 e 7 dias, respectivamente. Foram definidos sistemas cromatográficos em papel e em camada delgada para determinação da pureza radioquímica das preparações. Os estudos de biodistribuição realizados com a hidroxiapatita marcada com 90Y e 177Lu mostraram a estabilidade in vivo dos compostos, não tendo ocorrido extravasamento articular nem liberação do radionuclídeo livre para a circulação, confirmando o potencial de ambos para aplicação em radiosinovectomia.
Palavras-Chave: radiopharmaceuticals; labelled compounds; yttrium 90; lutetium 177; mucopolysaccharides; chemical analysis; nuclear medicine; viral diseases
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IPEN-DOC 11776
- QUARESMA, JUAREZ A.S.
;- BARROS, VERA L.R.S.
;- PAGLIARI, CARLA
;- FERNANDES, ELAINE R.
;- QUEDES, FERNANDA
;- TAKAKURA, CLEUSA F.H.
;- ANDRADE JUNIOR, HEITOR F. de
; - VASCONCELOS, PEDRO F.C.
;- DUARTE, MARIA I.S.
. Revisiting the liver in human yellow fever. Virus-induced apoptosis in hepatocytes associated with TGF-'beta', TNF- 'alpha' and NK cells activity. Virology, v. 345, p. 22-30, 2006.Palavras-Chave: infectious diseases; fever; viral diseases; apoptosis; biological markers; immunity; lymphokines; pathogenesis
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IPEN-DOC 19519Azidothymidine is effective against human multiple myeloma: a new use for an old drug?. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry, v. 13, n. 1, p. 186-192, 2013.
Palavras-Chave: neoplasms; plasma cells; hemic diseases; mortality; anti-infective agents; viral diseases; cell proliferation; apoptosis; angiogenesis; toxicity
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IPEN-DOC 11777
- QUARESMA, JUAREZ A.S.
;- BARROS, VERA L.R.S.
;- FERNANDES, ELAINE R.
;- PAGLIARI, CARLA
;- GUEDES, FERNANDA
;- VASCONCELOS, PEDRO F. da C.
;- ANDRADE JUNIOR, HEITOR F.
; - DUARTE, MARIA I.S.
. Immunohistochemical examination of the role fas ligand and lymphocytes in the pathogenesis of human liver yellow fever. Virus Research, v. 116, p. 91-97, 2006.Palavras-Chave: infectious diseases; fever; immunity; pathology; insects; viral diseases; necrosis; apoptosis; lymphocytes
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IPEN-DOC 28410
- SILVA, MATHEUS S.
;- TAVARES, ANA P.M.
;- COELHO, LUIZ F.L.
;- DIAS, LIGIA E.M.F.
; - CHURA-CHAMBI, ROSA M.
; - FONSECA, FLAVIO G. da
;- SALES, MARIA G.F.
;- FIGUEIREDO, EDUARDO C.
. Rational selection of hidden epitopes for a molecularly imprinted electrochemical sensor in the recognition of heat-denatured dengue NS1 protein. Biosensors and Bioelectronics, v. 191, p. 1-8, 2021. DOI: 10.1016/j.bios.2021.113419 Abstract: Rational selection of predicted peptides to be employed as templates in molecular imprinting was carried out for the heat-denatured non-structural protein 1 (NS1) of dengue virus (DENV). Conservation analysis among 301 sequences of Brazilian isolates of DENV and zika virus (ZIKV) NS1 was carried out by UniProtKB, and peptide selection was based on in silico data of the conservational, structural and immunogenic properties of the sequences. The selected peptide (from dengue 1 NS1) was synthesized and employed as a template in the electropolymerization of polyaminophenol-imprinted films on the surface of carbon screen-printed electrodes. Heat denaturation of the protein was carried out prior to analysis, in order to expose its internal hidden epitopes. After removal of the template, the molecularly imprinted cavities were able to rebind to the whole denatured protein as determined by electrochemical impedance spectroscopy. This label-free sensor was efficient to distinguish the NS1 of DENV from the NS1 of ZIKV. Additionally, the sensor was also selective for dengue NS1, in comparison with human serum immunoglobulin G and human serum albumin. Additionally, the device was able to detect the DENV NS1 at concentrations from 50 to 200 μg L−1 (RSD below 5.04%, r = 0.9678) in diluted human serum samples. The calculated LOD and LOQ were, respectively, 29.3 and 88.7 μg L−1 and each sensor could be used for six sequential cycles with the same performance.Palavras-Chave: viral diseases; viral diseases; zika virus; protein denaturation; polymers; sensors
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IPEN-DOC 25778
- MACHI, ANDRE R.
; - MAYNE, RAQUEL R.
;- GAVA, MARCIO A.
;- ARTHUR, PAULA B.
; - ARTHUR, VALTER
. Gamma radiation sterilization dose of adult males in Asian tiger mosquito pupae.
Insects,
v. 10,
n. 4,
p. 1-11,
2019.
DOI:
10.3390/insects10040101
Abstract: The pathogen-carrying tiger mosquito, Aedes albopictus, has spread from theWestern Pacific
and Southeast Asia to Europe, Africa, the Middle East, North and South America, and the Caribbean.
This species of mosquito transmits arboviral infections, such as yellow fever, chikungunya, dengue,
zika, and several encephalitides. The objective of this research was to provide a radiation dose
inducing sterilization in adult male Ae. albopictus in the pupal stage. A cobalt-60 source of gamma
radiation at a dose rate of 381 Gy/h was used. The pupae were irradiated with doses of 0 (control), 20,
30, 40, 50, and 60 Gy. Each treatment had a total of five replications using 60 pupae. After irradiation,
the different phases of Ae. albopictus development (egg, larva, pupa, and adult) in the F1 generation
were observed daily. Parameters such as viability, fertility, longevity, and mortality were recorded.
The results from these studies showed that a dose of 60 Gy was necessary to sterilize 100% of the
male Ae. albopictus pupae.
Palavras-Chave: gamma radiation; sterilization; mosquitoes; viruses; ionizing radiations; radiation effects; cobalt 60; viral diseases; radiation doses
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IPEN-DOC 25863
- CHURA-CHAMBI, ROSA M.
; - SILVA, CLEIDE M.R. da
; - PEREIRA, LENNON R.
;- BARTOLINI, PAOLO
; - FERREIRA, LUIS C. de S.
;- MORGANTI, LIGIA
. Protein refolding based on high hydrostatic pressure and alkaline pH: application on a recombinant dengue virus NS1 protein.
PLoS One,
v. 14,
n. 1,
p. 1-14,
2019.
DOI:
10.1371/journal.pone.0211162
Abstract: In this study we evaluated the association of high hydrostatic pressure (HHP) and alkaline
pH as a minimally denaturing condition for the solubilization of inclusion bodies (IBs) generated
by recombinant proteins expressed by Escherichia coli strains. The method was successfully
applied to a recombinant form of the dengue virus (DENV) non-structural protein 1
(NS1). The minimal pH for IBs solubilization at 1 bar was 12 while a pH of 10 was sufficient
for solubilization at HHP: 2.4 kbar for 90 min and 0.4 kbar for 14 h 30 min. An optimal refolding
condition was achieved by compression of IBs at HHP and pH 10.5 in the presence of
arginine, oxidized and reduced glutathiones, providing much higher yields (up to 8-fold) than
association of HHP and GdnHCl via an established protocol. The refolded NS1, 109 ± 9.5
mg/L bacterial culture was recovered mainly as monomer and dimer, corresponding up to
90% of the total protein and remaining immunologically active. The proposed conditions
represent an alternative for the refolding of immunologically active recombinant proteins
expressed as IBs.
Palavras-Chave: viruses; viral diseases; proteins; ph value; hydrostatics; pressure dependence; immunoassay
-
IPEN-DOC 25191
- SILVA, CLEIDE M.R. da
; - CHURA-CHAMBI, ROSA M.
; - PEREIRA, LENNON R.
;- CORDEIRO, YRAIMA
;- FERREIRA, LUIS C. de S.
;- MORGANTI, LIGIA
. Association of high pressure and alkaline condition for solubilization of inclusion bodies and refolding of the NS1 protein from zika virus.
BMC Biotechnology,
v. 18,
n. 78,
2018.
DOI:
10.1186/s12896-018-0486-2
Abstract: Background: Proteins in inclusion bodies (IBs) present native-like secondary structures. However, chaotropic agents at
denaturing concentrations, which are widely used for IB solubilization and subsequent refolding, unfold these
secondary structures. Removal of the chaotropes frequently causes reaggregation and poor recovery of bioactive
proteins. High hydrostatic pressure (HHP) and alkaline pH are two conditions that, in the presence of low level of
chaotropes, have been described as non-denaturing solubilization agents. In the present study we evaluated the
strategy of combination of HHP and alkaline pH on the solubilization of IB using as a model an antigenic form of the
zika virus (ZIKV) non-structural 1 (NS1) protein.
Results: Pressure-treatment (2.4 kbar) of NS1-IBs at a pH of 11.0 induced a low degree of NS1 unfolding and led to
solubilization of the IBs, mainly into monomers. After dialysis at pH 8.5, NS1 was refolded and formed soluble
oligomers. High (up to 68 mg/liter) NS1 concentrations were obtained by solubilization of NS1-IBs at pH 11 in the
presence of arginine (Arg) with a final yield of approximately 80% of total protein content. The process proved to be
efficient, quick and did not require further purification steps. Refolded NS1 preserved biological features regarding
reactivity with antigen-specific antibodies, including sera of ZIKV-infected patients. The method resulted in an increase
of approximately 30-fold over conventional IB solubilization-refolding methods.
Conclusions: The present results represent an innovative non-denaturing protein refolding process by means of the
concomitant use of HHP and alkaline pH. Application of the reported method allowed the recovery of ZIKV NS1 at a
condition that maintained the antigenic properties of the protein.
Palavras-Chave: zika virus; proteins; viral diseases; hydrostatics; pressure dependence; high pressure; ph value; alkaline hydrolysis
-
IPEN-DOC 24293
- SILVA, CLEIDE M.R. da
.
Renaturação das proteínas não estruturais 1(NS1) dos vírus da zika e da dengue utilizando altas pressões
/ Refolding of non-structural proteins 1 (NS1) of zika and dengue viruses using high
.
2017.
Dissertação (Mestrado em Tecnologia Nuclear) -
Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP,
São Paulo.
78 p.
Orientador: Ligia Ely Morganti Ferreira Dias.
DOI:
10.11606/D.85.2018.tde-26102017-123523
Abstract: As principais matérias primas necessárias para a preparação de testes diagnósticos são as proteínas dos patógenos que necessariamente apresentem as estruturas nativas. O objetivo do presente estudo foi a obtenção das proteínas não estruturais 1 (NS1) dos vírus da dengue (DENV) e da zika (ZIKV) a partir dos corpúsculos de inclusão (CI) produzidos em bactérias Escherichia coli. Mostramos que a combinação de alta pressão hidrostática (APH) e pH alcalino é eficiente para a solubilização de NS1-CI. A incubação em 2,4 kbar das suspensões de NS1-CI em pH alcalino mostrou-se eficiente para a solubilização da NS1. A presença de Arg promove a dissociação de oligômeros. A aplicação de 2,4 kbar às suspensões de NS1-CI em pH de 10,5 (DENV) e de 11,5 (ZIKV) na presença de Arg e um par redox, seguida de diálise em tampão em pH 8,5, foram as condições escolhidas para o reenovelamento de NS1. Obtivemos ambas NS1 com rendimentos entre 75% e 90% em relação às quantidades totais das proteínas presente nos correspondentes CI de NS1. As NS1 reenoveladas apresentaram reatividade comparável às proteínas obtidas utilizando um protocolo convencional estabelecido, com rendimentos mais de 25 vezes superiores. Foi obtido um processo altamente eficiente para o reenovelamento de NS1 apresentando características biológicas preservadas em relação a reatividade com anticorpos específicos de antígeno, incluindo soro de paciente infectado com zikv e que, portanto, podem ser usados como antígeno para o desenvolvimento de vacinas ou testes de diagnóstico. Além disso, este estudo descreve a criação de um processo inovador, que é a utilização concomitante de APH e pH alcalino, para solubilização e posterior reenovelamento de NS1-CI que podem ser utilizados para outras proteínas relevantes.
Palavras-Chave: microorganisms; bacteria; escherichia coli; viral diseases; microstructure; folding model; pore pressure; hydrostatics; stability; antibody formation; alkaline hydrolysis; fluorescence spectroscopy; enzyme immunoassay
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O gerenciamento do Repositório está a cargo da Biblioteca do IPEN. Constam neste RI, até o presente momento 20.950 itens que tanto podem ser artigos de periódicos ou de eventos nacionais e internacionais, dissertações e teses, livros, capítulo de livros e relatórios técnicos. Para participar do RI-IPEN é necessário que pelo menos um dos autores tenha vínculo acadêmico ou funcional com o Instituto. Nesta primeira etapa de funcionamento do RI, a coleta das publicações é realizada periodicamente pela equipe da Biblioteca do IPEN, extraindo os dados das bases internacionais tais como a Web of Science, Scopus, INIS, SciElo além de verificar o Currículo Lattes. O RI-IPEN apresenta também um aspecto inovador no seu funcionamento. Por meio de metadados específicos ele está vinculado ao sistema de gerenciamento das atividades do Plano Diretor anual do IPEN (SIGEPI). Com o objetivo de fornecer dados numéricos para a elaboração dos indicadores da Produção Cientifica Institucional, disponibiliza uma tabela estatística registrando em tempo real a inserção de novos itens. Foi criado um metadado que contém um número único para cada integrante da comunidade científica do IPEN. Esse metadado se transformou em um filtro que ao ser acionado apresenta todos os trabalhos de um determinado autor independente das variáveis na forma de citação do seu nome.
A elaboração do projeto do RI do IPEN foi iniciado em novembro de 2013, colocado em operação interna em julho de 2014 e disponibilizado na Internet em junho de 2015. Utiliza o software livre Dspace, desenvolvido pelo Massachusetts Institute of Technology (MIT). Para descrição dos metadados adota o padrão Dublin Core. É compatível com o Protocolo de Arquivos Abertos (OAI) permitindo interoperabilidade com repositórios de âmbito nacional e internacional.
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2. A experiência do Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN-CNEN/SP) na criação de um Repositório Digital Institucional – RDI, clique aqui.
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Operando, inicialmente como uma base de dados referencial o Repositório foi disponibilizado na atual plataforma, em junho de 2015. No Repositório está disponível o acesso ao conteúdo digital de artigos de periódicos, eventos, nacionais e internacionais, livros, capítulos, dissertações, teses e relatórios técnicos.
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