Desenvolvimento de processo de fermentacao em biorreator para producao de prolactina humana secretada no espaco periplasmico de Escherichia coli
| dc.contributor.advisor | Carlos Roberto Jorge Soares | pt_BR |
| dc.contributor.author | OLIVEIRA, TAIS L. de | pt_BR |
| dc.coverage | Nacional | pt_BR |
| dc.date.accessioned | 2014-10-09T12:55:35Z | pt_BR |
| dc.date.accessioned | 2014-10-09T14:04:57Z | |
| dc.date.available | 2014-10-09T12:55:35Z | pt_BR |
| dc.date.available | 2014-10-09T14:04:57Z | |
| dc.date.issued | 2008 | pt_BR |
| dc.description.abstract | A Prolactina (PRL) é um dos hormônios mais versáteis em termos de ação biológica. Sua ação mais conhecida está relacionada com o estímulo da lactação e regulação do crescimento e da diferenciação da glândula mamária; também apresenta importante aplicação diagnóstica. Somando os crescentes estudos sobre suas possíveis aplicações terapêuticas, fica cada vez mais notória a necessidade da obtenção desse hormônio puro, biologicamente ativo e na sua forma autêntica.O objetivo fundamental desse projeto foi a produção de hPRL em escala laboratorial a partir de bactérias (E.coli) modificadas geneticamente, utilizando um sistema de expressão baseado no promotor Lambda () PL, o mesmo utilizado com sucesso em nosso laboratório na expressão do hGH. Descrevemos nesse trabalho um processo de cultivo em biorreator, onde não foi utilizado o repressor cIts, uma proteína termo-sensível que usualmente é utilizada para inibir o funcionamento do promotor PL durante crescimento a 30ºC. O processo de cultivo apresenta basicamente três etapas: na primeira etapa o crescimento é realizado sem adição contínua de nutrientes (cultivo em batch), na segunda etapa ocorre adição contínua de nutrientes e carboidrato (cultivo em fed-batch) e na última etapa é realizada a ativação, caracterizada pelo aumento da temperatura mantendo-se a adição de nutrientes e carboidrato. Esse processo de fermentação rápido e flexível, com duração média de 20 horas, permitiu obter uma biomassa final correspondente à densidade óptica de aproximadamente 30 A600nm (unidades ópticas de absorbância em 600nm) e com uma expressão da ordem de 1g de hPRL mL-1 A600 -1, as mais altas já relatadas para secreção de prolactina no espaço periplásmico. A hPRL monomérica foi purificada e caracterizada por métodos físico-químicos e biológicos, os quais confirmaram a sua atividade biológica e imunológica, o seu correto processamento e uma massa molecular relativa (Mr) de 22.906. | pt_BR |
| dc.description.notasgerais | Dissertacao (Mestrado) | pt_BR |
| dc.description.notastese | IPEN/D | pt_BR |
| dc.description.teseinstituicao | Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP | pt_BR |
| dc.format.extent | 61 | pt_BR |
| dc.identifier.citation | OLIVEIRA, TAIS L. de. <b>Desenvolvimento de processo de fermentacao em biorreator para producao de prolactina humana secretada no espaco periplasmico de Escherichia coli</b>. Orientador: Carlos Roberto Jorge Soares. 2008. 61 f. Dissertacao (Mestrado) - Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP, Sao Paulo. DOI: <a href="https://dx.doi.org/10.11606/D.85.2008.tde-07072009-152955">10.11606/D.85.2008.tde-07072009-152955</a>. Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/11767. | |
| dc.identifier.doi | 10.11606/D.85.2008.tde-07072009-152955 | |
| dc.identifier.uri | http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/11767 | pt_BR |
| dc.local | Sao Paulo | pt_BR |
| dc.rights | openAccess | pt_BR |
| dc.subject | lth | pt_BR |
| dc.subject | escherichia coli | pt_BR |
| dc.subject | bioreactors | pt_BR |
| dc.subject | fermentation | pt_BR |
| dc.title | Desenvolvimento de processo de fermentacao em biorreator para producao de prolactina humana secretada no espaco periplasmico de Escherichia coli | pt_BR |
| dc.title.alternative | Development of the fermentation process in bioreactor for the production of human prolactin secreted in the periplasmic space of Escherichia coli | pt_BR |
| dc.type | Dissertação | pt_BR |
| dspace.entity.type | Publication | |
| ipen.autor | TAIS LIMA DE OLIVEIRA | |
| ipen.codigoautor | 3901 | |
| ipen.contributor.ipenauthor | TAIS LIMA DE OLIVEIRA | |
| ipen.date.recebimento | 09-03 | pt_BR |
| ipen.identifier.ipendoc | 13223 | pt_BR |
| ipen.identifier.localizacao | T577.17 / O48d | pt_BR |
| ipen.meioeletronico | http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-07072009-152955/ | pt_BR |
| ipen.type.genre | Dissertação | |
| relation.isAuthorOfPublication | 3221ac11-c270-4492-b310-66005a7298ff | |
| relation.isAuthorOfPublication.latestForDiscovery | 3221ac11-c270-4492-b310-66005a7298ff | |
| sigepi.autor.atividade | OLIVEIRA, TAIS L. DE:3901:810:S | pt_BR |