ADRIANA REGINA MIRANDA
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Dissertação IPEN-doc 16728 Avaliação da expressão e localização da conexina 43 na injúria isquêmica renal aguda2011 - MIRANDA, ADRIANA R.As células necessitam do contato com outras células e com a matriz extracelular, para a formação de tecidos. As junções gap são estreitos canais que conectam o citoplasma de células adjacentes, promovendo a passagem de íons orgânicos, aminoácidos, nucleotídeos e outros metabólitos. Estas junções são compostas por dois conexons ou hemicanais, que atravessam a membrana plasmática da célula a que pertencem, e são compostos por seis proteínas integrais de membrana denominadas conexinas (Cxs). A Cx43 é a mais expressa, e é fosforilada ao longo do ciclo de vida, sofrendo mudanças conformacionais, resultando em diferentes isoformas (P0, P1 e P2), apresentando propriedades distintas. A Cx43 apresenta-se distribuída em todo o rim adulto. A injúria renal aguda (IRA) é uma síndrome metabólica em que ocorre redução aguda da função renal e rápida diminuição da taxa de filtração glomerular, sendo hipóxia decorrente da isquemia sua causa principal. A restrição de oxigênio e nutrientes, e o acúmulo de metabólitos, resultam na injúria das células epiteliais tubulares. A depleção dos níveis de ATP, aumento nos níveis de cálcio intracelular, alterações na membrana e deformações no citoesqueleto caracterizam esta injúria. A reoxigenação tecidual atua como agressão adicional devido à liberação de radicais livres. Estudos sugerem que a ativação de hemicanais de Cx43, resultante da desfosforilação da proteína, durante depleção de ATP, esteja envolvida na IRA. Este trabalho verificou o envolvimento da Cx43 em modelo murino desta injúria, ocasionada por isquemia/reperfusão. Foram utilizados camundongos machos da linhagem C57BL/6J. A isquemia foi induzida por clampeamento das artérias renais por 45 minutos. A reperfusão ocorreu durante 24 horas após cirurgia. Foram utilizados 6 animais por grupo (isquêmicos, reperfundidos e controle). Após sacrifício, fragmentos dos rins foram submetidos a ensaios de western blot, PCR em tempo real, imuno-histoquímica e imunofluorescência. O modelo experimental foi validado através da dosagem de uréia e creatinina plasmática. As análises estatísticas foram realizadas pela análise de variância (ANOVA), seguido do teste de Bonferroni. Observou-se aumento significativo dos níveis de uréia e creatinina nos animais isquêmicos e reperfundidos, em relação ao controle. A expressão gênica apresentou aumento significativo apenas nos rins de camundongos reperfundidos (1,9 vezes; P<0,01 vs controle). No western blot verificou-se aumento na quantidade da isoforma hiperfosforilada da Cx43 (P2) em rins isquêmicos (2,73 vezes; P<0,05 vs controle), com diminuição significativa nos reperfundidos (2,37 vezes; P<0,05 vs isquêmico). Nas isoformas menos fosforiladas (P1/P0), observou-se aumento nos rins isquêmicos (2,33 vezes; P<0,05 vs controle), com diminuição nos reperfundidos (10 vezes; P<0,01 vs isquêmico). Nos ensaios imuno-histológicos verificou-se diferentes localizações da Cx43 nas células epiteliais de túbulos corticais nos grupos comparados. Nos controles verificou-se distribuição difusa, e nos isquêmicos observou-se intensa marcação em superfície celular apical. Nos rins reperfundidos, a distribuição da Cx43 foi basolateral. As alterações observadas na expressão gênica, fosforilação protéica e distribuição da Cx43 nos rins foram semelhantes às mudanças observadas na isquemia cardíaca. Este estudo mostrou pela primeira vez a regulação da Cx43 em níveis transcricionais e pós-traducionais, e sua localização celular na IRA ocasionada por isquemia/reperfusão, indicando sua participação neste processo.Artigo IPEN-doc 16101 Immobilized kidney 28 KDa endostatin-related (KES28KDa) fragment promotes endothelial cell survival2010 - BELLINI, MARIA H.; MALPIGHI, THIAGO F.; CALVO, FERNANDA B.; MIRANDA, ADRIANA R.; SPENCER, PATRICK J.; CICHY, MILENA C.; SIMONS, SIMONE M.; TAVASSI, ANA M.C.; SANTOS, MARINILCE F. dos; RODRIGUES, CONSUELO J.; SCHOR, NESTORArtigo IPEN-doc 16097 Study of blood porphyrin spectral profile for diagnosis of chronic renal failure2010 - TRISTAO, VIVIAN R.; CARVALHO, FERNANDO F. de; GOMES, CINTHIA Z.; MIRANDA, ADRIANA R.; VEQUI-SUPLICY, CINTIA C.; LAMY, MARIA T.; SCHOR, NESTOR; BELLINI, MARIA H.Artigo IPEN-doc 16100 Erythrocyte protoporphyrin fluorescence as a potential marker of diabetes2010 - FAUAZ, GRASIELE; MIRANDA, ADRIANA R.; GOMES, CINTHIA Z.; COURROL, LILIA C.; SILVA, FLAVIA R. de O.; ROCHA, FLAVIA G. de G.; SCHOR, NESTOR; BELLINI, MARIA H.