RENATA DAMIANI

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  • Resumo IPEN-doc 16586
    RP-HPLC qualitative and quantitative analysis of glycoprotein hormones in the presence of high amounts of human serum albumin: hLH, hCG, hFSH and hTSH
    2011 - ALMEIDA, B.E.; OLIVEIRA, J.E.; DAMIANI, R.; DALMORA, S.L.; BARTOLINI, P.; RIBELA, M.T.C.P.
  • Resumo IPEN-doc 16585
    First expression of the antagonist of mouse prolactin (S177D-mPRL) by adherent dhfr-CHO cell using p658 vector
    2011 - SUZUKI, M.F.; ARTHUSO, F.S.; OLIVEIRA, J.E.; CAPONE, M.V.; DAMIANI, R.; OLIVEIRA, N.A.J.; GOULART RODRIGUES, H.; RIBELA, M.T.C.P.; SOARES, C.R.J.; BARTOLINI, P.
  • Resumo IPEN-doc 16160
    Charge isomer distribution of different pituitary and recombinant human thyrotropin (hTSH) preparations
    2010 - DAMIANI, R.; OLIVEIRA, J.E.; ALMEIDA, B.E.; BARTOLINI, P.; RIBELA, M.T.C.P.
  • Resumo IPEN-doc 16159
    International collaborative study to establish the 2nd WHO International Standard of Human Recombinant Fillicle Stimulating Hormone for Bioassai
    2010 - OLIVEIRA, J.E.; ALMEIDA, B.E.; DAMIANI, R.; BARTOLINI, P.; RIBELA, M.T.C.P.
    The aim of the International Collaborative Study proposed by the National Institute for Biological Standards and Control (WHO) is to calibrate a new preparation of human follicle stimulating hormone (hFSH) relative to the 1st International Standard for bioassay of recombinant-hFSH (WHO 92/642), which is almost exhausted and requires to be replaced. The candidate preparation and four other samples, which correspond to this preparation stored at elevated temperatures (K, L, M, N), were analyzed qualitatively and quantitatively in our laboratory, by reversed-phase high-performance liquid chromatography (RPHPLC). The candidate content determined in six assays (8.59 ± 0.41 μg/ampoule) was 20% lower, when compared with the current standard. Based on this, an average value of 110 IU FSH per ampoule could be assigned to this preparation. The main isoform of the candidate preparation showed a lower retention time (22.5 ± 0.83 min) relative to WHO 92/642 (22.8 ± 0.81 min) and also to an internal reference preparation (22.6 ± 0.86 min). These differences, though, were not significant (p>0.05). Practically identical contents were also determined for K, L, M and N ampoules (8.44 ± 0.20; 8.56 ± 0.33; 8.57 ± 0.38; 8.69 ± 0.30 μg/ampoule, respectively). No significant differences in FSH retention times between the candidate preparation and the ampoules stored at elevated temperatures were observed.
  • Resumo IPEN-doc 16158
    Physico-chemical quality control of human chrionic gonadotropin preparations
    2010 - ALMEIDA, B.E.; OLIVEIRA, J.E.; DAMIANI, R.; DALMORA, S.L.; BARTOLINI, P.; RIBELA, M.T.C.P.
  • Resumo IPEN-doc 16157
    Reversed-phase higg-performance liquid chromatography characterization of human menopausal gonadotropin preparations
    2010 - ALMEIDA, B.E.; OLIVEIRA, J.E.; DAMIANI, R.; SPIGOTI, G.; DALMORA, S.L.; BARTOLINI, P.; RIBELA, M.T.C.P.
  • Resumo IPEN-doc 11432
    Enrichment of human keratinocyte stem cells and inection of naked DNA in the lit/scid mouse: studies directed to the improvement of GH gene therapy
    2006 - CECCHI, C.R.; PERONI, C.N.; DAMIANI, R.; DANTAS, E.O.; ARKATEN, R.R.; BARTOLINI, P.
  • Artigo IPEN-doc 14342
    Produção em escala laboratorial de prolactina humana em células CHO adaptadas para o crescimento em suspensão
    2009 - ARTHUSO, FERNANDA dos S.; SUZUKI, MIRIAM F.; GOULART, HERBERT R.; SOUZA, JOSE M.; OLIVEIRA, JOAO E.; DAMIANI, RENATA; OLIVEIRA, TAIS L.; CAPONE, MARCOS V.N.; BARTOLINI, PAOLO; SOARES, CARLOS R.J.
    O Grupo de Hormônios do Centro de Biotecnologia do IPEN tem desenvolvido várias linhagens de células de ovário de hamster chinês (CHO) modificadas geneticamente e comprovadamente eficientes na expressão de proteínas heterólogas, dentre elas a prolactina humana (hPRL). No entanto, todas as nossas linhagens são cultivadas aderidas e dependentes da presença de soro fetal bovino (SFB) no meiode cultivo para um crescimento eficiente. Nesse trabalho foi realizada a adaptação da nossa linhagem produtora de hPRL para o crescimento em suspensão e na ausência de SFB. As células em suspensão apresentam um grande interesse industrial-farmacêutico, tanto pela facilidade de cultivo e ampliação de escala, como pela produtividade volumétrica. Os estudos para adaptação dessas células foram realizados com base no protocolo descrito por Sinacore e colaboradores (2000). Desta forma foi realizada uma produção laboratorial de hPRL em frascos "spinner" por 30 dias consecutivos, assim com, a sua purificação e caracterização.
  • Tese IPEN-doc 19942
    Influência do butirato de sódio, da cicloheximida e do cloreto de manganês na produtividade, glicosilação e propriedades biológicas da tireotrofina humana derivada de CHO
    2013 - DAMIANI, RENATA
    A influência do butirato de sódio (NaBu), do cloreto de manganês (MnCl2), combinados ou isolados, e da cicloheximida (CHX) na síntese de tireotrofina humana recombinante (r-hTSH) derivada de células CHO foi investigada pela primeira vez. Com exceção da CHX, que gerou uma redução de 1,5 vezes na produtividade volumétrica, todos os reagentes geraram um aumento (1,4 vezes para o MnCl2 e 3 vezes para o NaBu e NaBu+MnCl2) na produtividade volumétrica. Também foi observada uma diminuição no número de células viáveis com a utilização de todos os reagentes. A adição destes reagentes ao meio de cultura de células CHO produtoras de hTSH gerou também alterações na glicosilação do r-hTSH. As alterações geradas pela presença de CHX foram todas negativas, resultando em uma diminuição de 5,5% no conteúdo de ácido siálico, 10% na ocupação dos sítios de glicosilação, além de uma diminuição no conteúdo de todos os monossacarídeos neutros. Os demais reagentes, por outro lado, resultaram em alterações positivas. A presença de NaBu no meio de cultura acarretou um aumento de 12% no conteúdo de ácido siálico e de 3% na ocupação dos sítios de glicosilação. Com relação às estruturas de carboidratos presentes no hTSH, foi observado um aumento de 14% nas estruturas bi-antenárias, aumento no conteúdo de manose e fucose e uma diminuição no conteúdo de galactose e N-acetilglucosamina. A presença de MnCl2 no meio de cultura resultou em um aumento de 1,7% no conteúdo de ácido siálico e de 1,3% na ocupação dos sítios de glicosilação. Houve ainda um aumento no conteúdo de manose e N-acetilglucosamina e uma diminuição no conteúdo de fucose e galactose. Um aumento de 7% na freqüência de estruturas bi-antenárias foi também observado quando MnCl2 foi utilizado. O uso simultâneo de NaBu e MnCl2 proporcionou um aumento de 14% no conteúdo de ácido siálico e de 3% na ocupação dos sítios de glicosilação, bem como um aumento no conteúdo de todos os monossacarídeos neutros. Não houve, entretanto, alterações na freqüência das estruturas de carboidratos. Apesar de todas as alterações causadas pelos diferentes reagentes, não foram observadas diferenças na atividade biológica ou no comportamento farmacocinético das diferentes preparações de hTSH estudadas. Este estudo é extremamente relevante, tanto do ponto de vista do desenvolvimento de novos biofármacos, quanto do ponto de vista do controle de qualidade das glicoproteínas hormonais já utilizadas na clínica médica.