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  • Resumo IPEN-doc 30274
    Antitumoral efficacy of gold nanoparticles with polyphenols in breast cancer and metastatic cells in vitro
    2023 - SPADREZANO, ISADORA; RODRIGUES, MURILO A.V.; VIEIRA, DANIEL P.; LUGAO, ADEMAR B.
    Introduction and objective: Gold nanoparticles (AuNPs) present beneficial properties in cancer diagnosis and therapy, as they can be coated and biofunctionalized with bioactive molecules through surface modification using relatively non‐toxic reagents, enabling the reduction of metal ions, stabilization, and selective detection of cellular receptors [1]. The reduction of gold by phytochemicals to form nanoparticles represents promising methods in Green Nanotechnology. This study aims to compare the binding capacity and evaluate the antiproliferative potential of gold nanoparticles coated with tannic acid (TA‐AuNPs) against human breast tumor cell lines. Cytotoxicity was determined using the MTS method. Methodology: The synthesis of TA‐AuNPs was established through the chemical reduction, and the purification method was based on centrifugation, where the centrifuged sample (P1) was resuspended after removing and storing the supernatant (S1), thus generating three samples, including the non‐centrifuged (NC). The confirmation of TA‐AuNPs formation was achieved by UV‐Visible absorption spectroscopy, and the size determination of TA‐AuNPs was carried out using dynamic light scattering and Transmission Electron Microscopy (TEM) techniques. The Zeta potential was used to determine the stability of TA‐AuNPs. Human breast adenocarcinoma cell lines (MCF‐7 and MDA‐MB‐231) were used, and the cytotoxicity determination was performed using the MTS assay. Results and discussion: The synthesis of TA‐AuNPs showed a change in color, indicating the formation of spherical AuNPs. UV‐Visible analysis was performed for preliminary characterization, where the absorption band at a wavelength of 529 nm, correlated with the localized surface plasmon resonance band, indicates the presence of approximately 20 nm AuNPs in all samples. To evaluate the size of TA‐AuNPs, the samples were analyzed using the dynamic light scattering method. The hydrodynamic diameters measured indicate that centrifugation induces greater aggregation of the AuNPs. However, based on the polydispersity values ranging from 0.087 ‐ 0.186, the AuNPs showed uniform sizes. The Zeta potential was an effective indicator used as a criterion to classify and quantify stability, with the samples exhibiting magnitudes above 40 mV, indicating high stability. TEM images confirmed the presence of TA‐AuNPs in the samples and provided information about their dimensions, around approximately 20 nm with spherical morphology. The cytotoxicity assessment for validating TA‐AuNPs demonstrated that the coating plays a crucial role in the degree of internalization, and a higher quantity of specific receptors resulted in a greater internalization of TA‐ AuNPs. It was observed that there was a higher percentage of cell viability in MCF‐7 cells compared to MDA‐MB‐ 231 cells. Conclusions: The synthesis was efficient in obtaining TA‐AuNPs. The TA‐AuNPs showed a narrow size distribution, predominantly spherical morphology, and low PDI, indicating significant potential for biomedical applications in the healthcare field. The results satisfactorily and efficiently demonstrated that TA‐AuNPs are effective against breast cancer cells (MCF‐7) and exhibit higher efficiency in targeting metastatic breast cancer cells (MDA‐MB‐ 231), highlighting their significant potential for various medical applications in the field of nanomedicine.
  • Resumo IPEN-doc 29445
    Aplicação de nanopartículas de ouro preparadas com ácido tânico em células cancerígenas
    2022 - SPADREZANO, I.; FREITAS, L.F. de; BATISTA, J.G.; SOUSA, T.d.; LUGAO, A.B.
    As nanopartículas de ouro (AuNPs) apresentam propriedades essenciais para diagnóstico e terapia, como facilidade na sua síntese, nas modificações de sua superfície, no controle de monodispersão da solução e do tamanho. A partir de modificação química da superfície, a redução de ouro oriunda de fitoquímicos para a formação de nanopartículas é um método promissor da nanotecnologia verde. O composto responsável pela redução e estabilização, nesse respectivo trabalho, é o ácido tânico (AT) obtido através da hidrólise do tanino, um polifenol sintetizado pelas plantas. O AT possui atividade antioxidante, proporcionada pelas hidroxilas presentes na molécula, neutralizando a atividade de radicais livres gerados no organismo. Uma das principais causas dos cânceres é decorrente da fosforilação anormal dos resíduos de tirosina que faz com que a fosforilação seja mantida, levando a uma ativação permanente dos sinais de transdução. As proteínas tirosinas quinases (PTKs) são um grupo de enzimas responsável por catalisar a fosforilação dos resíduos de tirosina nas proteínas, sendo necessária para a manutenção do estado cancerígeno. O AT possui alta capacidade de inibição das PTKs. A síntese de AuNPs-AT foi estabelecida pelo procedimento de redução química, utilizando uma solução de sal de ouro (NaAuCl4) que foi acrescida em uma solução de AT sob refrigeração. Os diâmetros hidrodinâmicos medidos na amostra não centrifugada, designada como NC, apresentou tamanho 37,88 nm, na amostra centrifugada uma vez, nomeada como S1, 38,85 nm e na amostra centrifugada duas vezes, denominada como S2, 40,50 nm. Foi perceptível o efeito das centrifugações a fim de retirar o excesso de agente estabilizante que não reagiu, foi permitido uma maior agregação das nanopartículas, segregando os variados tamanhos. Os valores do índice de polidispersão (PDI) das AuNPs-AT estão na faixa de 0,245 – 0,262, sendo considerada como de polidispersividade média, supondo que os agregados de nanopartículas estavam com tamanhos uniformes entre si. A citotoxicidade sobre as células MCF-7 (células tumorais) e HUVEC (células não tumorais) foi realizada por meio do método MTT, com a concentração de 25% e 50%. Houve um aumento significativo dos índices de absorbância em concentração 50%, induzido pela amostra AuNPs-AT S2 em células não tumorais, indicando menor citotoxicidade. No caso das células tumorais, induzidas pelas AuNPs-AT NC em concentração de 25% foram capazes de causar morte celular. Os resultados provaram, de forma satisfatória e aprimorada, a formação de AuNPs pelo método de síntese verde com as alterações propostas. O revestimento através do ácido tânico apresentou maior eficiência na inibição e efeito antitumoral, conforme mostrado nos ensaios de citotoxicidade. Nesse estudo, as nanopartículas tinham diâmetro de ? 39,08 nm, o tamanho e o recobrimento não foram consideravelmente tóxicos em aplicações para fins médicos. No geral, as AuNPs-AT foram bem toleradas pelas células.