Importância do receptor do hormônio do crescimento no transporte de GH para o sistema nervoso central

Abstract

O hormônio do crescimento (GH) apresenta uma série de ações sistêmicas, além de atuar diretamente no sistema nervoso central (SNC). O mecanismo pelo qual esse e outros hormônios proteicos entram no SNC a partir da circulação ainda não é bem compreendido. A resposta a essa questão se torna mais desafiadora considerando que o GH possui peso molecular relativamente alto (22 kDa), o que pelos conhecimentos atuais inviabilizaria a sua passagem através da barreira hematoencefálica (BHE) sem a ação de um sistema de transporte. Considerando a alta expressão do receptor do hormônio do crescimento (GHr) no encéfalo, incluindo estruturas que fazem a interface entre a circulação sistêmica e o SNC (plexo coróide e eminência mediana, por exemplo), existe a hipótese do GHr se ligar a esse hormônio e transportá-lo para o parênquima cerebral ou para o líquido encefalorraquidiano (LCR). O objetivo principal deste trabalho foi avaliar a importância do GHr para a passagem do GH da circulação sistêmica para o SNC. Para isso, estudamos o transporte do Hormônio do Crescimento Porcino (pGH) marcado com 131I (131I-pGH) para o SNC de camundongos knockout para o gene do GHr. Inicialmente testamos um modelo de camundongo knockout temporal (Cre-loxP), que perde a expressão do receptor na fase adulta, mas não houve uma completa deleção na região do cérebro. Optamos então, por um modelo de camundongo knockout global para o GHr (GHr -/-). Padronizamos a radiomarcação do pGH com 131I pelo método da Cloramina T (CLT), com elevado rendimento na marcação. Injetamos o radiomarcado nos animais knockout e controle comparando a cinética da permeação do 131I-pGH da circulação periférica para o SNC, através da coleta do cérebro total, hipotálamo, fígado e amostras de sangue desses animais em diferentes tempos de exposição. Como resultado o GH se difundiu em tecidos do cérebro, como o hipotálamo, sem a limitação de um transporte mediado pelo seu receptor. Contribuindo assim, para compreender um pouco mais sobre a ação fisiológica desse hormônio no SNC. Realizamos também um ensaio de imagem utilizando Tomografia Computadorizada de Emissão de Fóton Único/ Tomografia Computadorizada (SPECT-CT), avaliando a distribuição no cérebro do GH marcado desta vez com 123I. Foi demonstrado o grande potencial desta ferramenta para estudos futuros, após adequações do método, na avaliação do, mecanismo de transporte do GH para o SNC.