Avaliação da citotoxicidade direta e indireta de arcabouços de quitosana nanoestruturados com tripolifosfato de sódio visando sua utilização como biocurativos

Abstract

O desenvolvimento de arcabouços feitos de materiais biocompatíveis, biodegradáveis e bioativos, tem apresentado um grande potencial na bioengenharia de tecidos. A quitosana é um biomaterial com diversas propriedades biológicas que permite a elaboração de um arcabouço com qualidades satisfatórias. Devido à abundância, facilidade de obtenção e ação antimicrobiana, utilizou-se a quitosana reticulada com o tripolifosfato de sódio (TPP - H3P3O10), componente atóxico que oferece resistência através da interação iônica entre os compostos. O trabalho objetivou avaliar um curativo com a função auxiliar no reparo e regeneração pele. Foram realizados estudos com MEV, FT-IR e citotoxicidade direta e indireta. Para a citotoxicidade direta e indireta cada amostra foi cortada e esterilizada por exposição à lâmpada UV do fluxo laminar por 15 minutos cada lado. Em seguida, para a citotoxicidade indireta, as amostras foram colocadas separadamente em tubos estéreis para extração das possíveis substâncias tóxicas dos curativos. Os extratos foram filtrados, diluídos e adicionados a fibroblastos Balb/c 3T3 (20.000 células/poço), em microplacas de 96 poços, em oito diluições diferentes e após 24h foi determinado a citotoxicidade utilizando-se o método do Vermelho Neutro (NR) em 540 nm. Para o método direto, os curativos foram colocados em placas de 24 poços, onde foram adicionadas 25.000 células e após incubação as mesmas também foram avaliadas utilizando o NR. As células foram avaliadas e houve uma significante perda da viabilidade à medida que a concentração do extrato aumentava. Para as amostras CONTROLE, não foi observada variação significativa. Este resultado é corroborado pela notável diferença que a reticulação proporcionou as estruturas. Algumas composições granulares foram observadas nas micrografias da amostra reticulada. Acredita-se que esses granulados sejam excesso de agente reticulante, o que influencia na citotoxicidade dos arcabouços. A análise com FTIR mostrou que com o pico encontrado por volta de 1330 cm-1, tem-se a evidência das ligações iônicas entre TPP e quitosana. Os resultados apresentados indicam a continuação dos estudos utilizando concentrações reduzidas de agente reticulante visando a redução da citotoxicidade apresentada e melhora das características do biocurativo.