Terapia fotodinamica em infeccao induzida por Pseudomonas aeruginosa multirresistente. Estudo in vivo

Abstract

O objetivo deste trabalho foi verificar se a PDT pode reduzir infecção local em queimaduras de 3º grau infectadas por P. aeruginosa MR em camundongos e prevenir bacteremia. In vitro, a PDT foi realizada com azul de metileno (AM) associado a laser de =660 nm em P. aeruginosa ATCC 27853 (PaATCC) e multiresistente (PaMR). HB:La+3 foi irradiada com LED azul e vermelho em cepas de PaMR. Verapamil (Vp) foi testado como inibidor de bombas de efluxo associado tanto a HB:La+3 como a AM. In vivo, foi realizado teste de letalidade para a HB:La+3 e desenvolvido um modelo de infecção em queimaduras de 3º. grau em camundongos onde a PDT foi realizada em uma e duas sessões. O número de UFC/mL de PaMR após a PDT foram avaliadas localmente e na circulação sanguínea, e os animais foram observados quanto ao tempo de sobrevivência. In vitro, ocorreu redução de um log de PaATCC após 8 J/cm2 e de PaMR após 32 J/cm2. HB:La+3 reduziu 5 logs de PaMR após 24 J/cm2. Não houve diferença quando Vp foi associado à HB:La+3, porém quando associado a AM a redução foi de 2 logs após 16 J/cm2. In vivo, o modelo de queimadura e infecção proposto foi capaz de induzir infecção letal em 24 horas. O teste de letalidade para HB:La+3 não demonstrou efeito letal em camundongos. PDT reduziu 2 logs de PaMR localmente, retardou bacteremia e manteve a carga bacteriana sanguínea 2 logs menos comparados ao controle. A PDT, em uma e duas sessões, aumentou o tempo de sobrevida dos animais em 24 horas. Conclusão: In vitro, PaMR necessita de uma taxa de fluência maior para ser eliminada do que PaATCC; houve maior redução de PaMR utilizando HB:La+3 quando comparado a AM. Não houve diferença quando Vp foi associado à HB:La+3, mas a redução de PaMR foi maior com AM associado à Verapamil. In vivo, o modelo de queimadura e infecção induziu infecção letal; HB:La+3 não causou efeito letal; PDT reduziu PaMR localmente, retardou bacteremia, manteve a carga bacteriana sanguínea mais baixa e aumentou a sobrevida dos camundongos. Não houve diferença quando a PDT foi realizada em uma ou duas sessões.