Avaliação da expressão e localização da conexina 43 na injúria isquêmica renal aguda

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dc.contributor.advisorMaria Helena Bellinipt_BR
dc.contributor.authorMIRANDA, ADRIANA R.pt_BR
dc.coverageNacionalpt_BR
dc.date.accessioned2014-10-09T12:33:46Zpt_BR
dc.date.accessioned2014-10-09T14:04:36Z
dc.date.available2014-10-09T12:33:46Zpt_BR
dc.date.available2014-10-09T14:04:36Z
dc.date.issued2011pt_BR
dc.description.abstractAs células necessitam do contato com outras células e com a matriz extracelular, para a formação de tecidos. As junções gap são estreitos canais que conectam o citoplasma de células adjacentes, promovendo a passagem de íons orgânicos, aminoácidos, nucleotídeos e outros metabólitos. Estas junções são compostas por dois conexons ou hemicanais, que atravessam a membrana plasmática da célula a que pertencem, e são compostos por seis proteínas integrais de membrana denominadas conexinas (Cxs). A Cx43 é a mais expressa, e é fosforilada ao longo do ciclo de vida, sofrendo mudanças conformacionais, resultando em diferentes isoformas (P0, P1 e P2), apresentando propriedades distintas. A Cx43 apresenta-se distribuída em todo o rim adulto. A injúria renal aguda (IRA) é uma síndrome metabólica em que ocorre redução aguda da função renal e rápida diminuição da taxa de filtração glomerular, sendo hipóxia decorrente da isquemia sua causa principal. A restrição de oxigênio e nutrientes, e o acúmulo de metabólitos, resultam na injúria das células epiteliais tubulares. A depleção dos níveis de ATP, aumento nos níveis de cálcio intracelular, alterações na membrana e deformações no citoesqueleto caracterizam esta injúria. A reoxigenação tecidual atua como agressão adicional devido à liberação de radicais livres. Estudos sugerem que a ativação de hemicanais de Cx43, resultante da desfosforilação da proteína, durante depleção de ATP, esteja envolvida na IRA. Este trabalho verificou o envolvimento da Cx43 em modelo murino desta injúria, ocasionada por isquemia/reperfusão. Foram utilizados camundongos machos da linhagem C57BL/6J. A isquemia foi induzida por clampeamento das artérias renais por 45 minutos. A reperfusão ocorreu durante 24 horas após cirurgia. Foram utilizados 6 animais por grupo (isquêmicos, reperfundidos e controle). Após sacrifício, fragmentos dos rins foram submetidos a ensaios de western blot, PCR em tempo real, imuno-histoquímica e imunofluorescência. O modelo experimental foi validado através da dosagem de uréia e creatinina plasmática. As análises estatísticas foram realizadas pela análise de variância (ANOVA), seguido do teste de Bonferroni. Observou-se aumento significativo dos níveis de uréia e creatinina nos animais isquêmicos e reperfundidos, em relação ao controle. A expressão gênica apresentou aumento significativo apenas nos rins de camundongos reperfundidos (1,9 vezes; P<0,01 vs controle). No western blot verificou-se aumento na quantidade da isoforma hiperfosforilada da Cx43 (P2) em rins isquêmicos (2,73 vezes; P<0,05 vs controle), com diminuição significativa nos reperfundidos (2,37 vezes; P<0,05 vs isquêmico). Nas isoformas menos fosforiladas (P1/P0), observou-se aumento nos rins isquêmicos (2,33 vezes; P<0,05 vs controle), com diminuição nos reperfundidos (10 vezes; P<0,01 vs isquêmico). Nos ensaios imuno-histológicos verificou-se diferentes localizações da Cx43 nas células epiteliais de túbulos corticais nos grupos comparados. Nos controles verificou-se distribuição difusa, e nos isquêmicos observou-se intensa marcação em superfície celular apical. Nos rins reperfundidos, a distribuição da Cx43 foi basolateral. As alterações observadas na expressão gênica, fosforilação protéica e distribuição da Cx43 nos rins foram semelhantes às mudanças observadas na isquemia cardíaca. Este estudo mostrou pela primeira vez a regulação da Cx43 em níveis transcricionais e pós-traducionais, e sua localização celular na IRA ocasionada por isquemia/reperfusão, indicando sua participação neste processo.pt_BR
dc.description.notasgeraisDissertação (Mestrado)pt_BR
dc.description.notasteseIPEN/Dpt_BR
dc.description.teseinstituicaoInstituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SPpt_BR
dc.format.extent58pt_BR
dc.identifier.citationMIRANDA, ADRIANA R. <b>Avaliação da expressão e localização da conexina 43 na injúria isquêmica renal aguda</b>. Orientador: Maria Helena Bellini. 2011. 58 f. Dissertação (Mestrado) - Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP, São Paulo. DOI: <a href="https://dx.doi.org/10.11606/D.85.2011.tde-25082011-162151">10.11606/D.85.2011.tde-25082011-162151</a>. Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/10008.
dc.identifier.doi10.11606/D.85.2011.tde-25082011-162151
dc.identifier.urihttp://repositorio.ipen.br/handle/123456789/10008pt_BR
dc.localSão Paulopt_BR
dc.rightsopenAccesspt_BR
dc.subjectkidneyspt_BR
dc.subjectischemiapt_BR
dc.subjecturogenital system diseasespt_BR
dc.titleAvaliação da expressão e localização da conexina 43 na injúria isquêmica renal agudapt_BR
dc.title.alternativeEvaluation of connexin 43 expression and localization in renal acute ischemic injurypt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
dspace.entity.typePublication
ipen.autorADRIANA REGINA MIRANDA
ipen.codigoautor8695
ipen.contributor.ipenauthorADRIANA REGINA MIRANDA
ipen.date.recebimento11-08pt_BR
ipen.identifier.ipendoc16728pt_BR
ipen.identifier.localizacaoT616.61 / M672apt_BR
ipen.meioeletronicohttp://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-25082011-162151/pt-br.phppt_BR
ipen.type.genreDissertação
relation.isAuthorOfPublication4b23af94-9cd1-43ab-ae0f-a010c2e0102f
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sigepi.autor.atividadeMIRANDA, ADRIANA R.:8695:820:Spt_BR
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