TAIS LIMA DE OLIVEIRA
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Resumo IPEN-doc 16600 Cycloheximide increases the synthesis of recombinant glycosylated human prolactin (G-hPRL) secreted by CHO cells2008 - SOARES, C.R.J.; HELLER, S.R.; OLIVEIRA, T.L.; ARTHUSO, F.; GOULART, H.R.; BARTOLINI, P.Resumo IPEN-doc 16598 Purification and characterization recombinant glycosylated human prolactin synthesized in cho cells2008 - OLIVEIRA, T.L.; HELLER, S.R.; OLIVEIRA, J.E.; ARTHUSO, F.S.; GOULART, H.R.; SOUSA, J.M.; SUZUKI, M.F.; BARTOLINI, P.; SOARES, C.R.S.Resumo IPEN-doc 15608 Physico-chemical and biological characterization of glycosylated human prolactin produced at IPEN2010 - GOULART, H.R.; ARTHUSO, F.S.; CAPONE, M.V.N.; OLIVEIRA, T.L.; OLIVEIRA, J.E.; SUZUKI, M.F.; SOUSA, J.M.; BARTOLINI, P.; SOARES, C.R.J.Resumo IPEN-doc 12449 The effect of cycloheximide on the glycosylation of recombinant human prolactin synthesized in cho cells2007 - HELLER, S.R.; OLIVEIRA, T.L.; ARTHUSO, F.S.; SOUSA, J.M.; BARTOLINI, P.; SOARES, C.R.Artigo IPEN-doc 14342 Produção em escala laboratorial de prolactina humana em células CHO adaptadas para o crescimento em suspensão2009 - ARTHUSO, FERNANDA dos S.; SUZUKI, MIRIAM F.; GOULART, HERBERT R.; SOUZA, JOSE M.; OLIVEIRA, JOAO E.; DAMIANI, RENATA; OLIVEIRA, TAIS L.; CAPONE, MARCOS V.N.; BARTOLINI, PAOLO; SOARES, CARLOS R.J.O Grupo de Hormônios do Centro de Biotecnologia do IPEN tem desenvolvido várias linhagens de células de ovário de hamster chinês (CHO) modificadas geneticamente e comprovadamente eficientes na expressão de proteínas heterólogas, dentre elas a prolactina humana (hPRL). No entanto, todas as nossas linhagens são cultivadas aderidas e dependentes da presença de soro fetal bovino (SFB) no meiode cultivo para um crescimento eficiente. Nesse trabalho foi realizada a adaptação da nossa linhagem produtora de hPRL para o crescimento em suspensão e na ausência de SFB. As células em suspensão apresentam um grande interesse industrial-farmacêutico, tanto pela facilidade de cultivo e ampliação de escala, como pela produtividade volumétrica. Os estudos para adaptação dessas células foram realizados com base no protocolo descrito por Sinacore e colaboradores (2000). Desta forma foi realizada uma produção laboratorial de hPRL em frascos "spinner" por 30 dias consecutivos, assim com, a sua purificação e caracterização.Artigo IPEN-doc 14975 Synthesis, purification and characterization of recombinant glycosylated human prolactin (G-hPRL) secreted by cycloheximide-treated CHO cells2010 - HELLER, S.R.; GOULART, H.R.; ARTHUSO, F.S.; OLIVEIRA, T.L.; BARTOLINI, P.; SOARES, C.R.J.Artigo IPEN-doc 15555 Enhancement of human prolactin synthesis by sodium butyrate addition to serum-free CHO cell culture2010 - GOULART, HERBERT R.; ARTHUSO, FERNANDA dos S.; CAPONE, MARCOS V.N.; OLIVEIRA, TAIS L. de; BARTOLINI, PAOLO; SOARES, CARLOS R.J.Sodium butyrate (NaBu) has been used as a productivity enhancer for the synthesis of recombinant proteins in Chinese hamster ovary (CHO) cells. Thus, the influence of NaBu on the production of recombinant human prolactin (hPRL) from CHO cells was investigated for the first time. CHO cell cultures were submitted to a treatment with different concentrations of NaBu (0.25 to 4 mM). Quantitative and qualitative analyses by reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) and Western blot or SDS-PAGE, carried out directly on CHO-conditioned medium, showed that the highest hPRL expression was obtained with 1 mM NaBu. In vitro biological assays based on noble rat lymphoma (Nb2) and mouse pro-B lymphoma (Ba/F3-LLP) cells were carried out on purified hPRL. Its bioactivity in the presence of NaBu was not apparently different from that of the First International Reference Reagent of recombinant hPRL (WHO 97/714). Our results show that NaBu increased the synthesis of recombinant hPRL in CHO cells, apparently without compromising either its structure or function.