FERNANDA DOS SANTOS ARTHUSO

FERNANDA DOS SANTOS ARTHUSO

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A practical and fast adaptation of CHO cells expressing human prolactin to grow in suspension and its application to laboratory production
2011 - ARTHUSO, F.S.; CAPONE, M.V.N.; SUZUKI, M.F.; SOUSA, J.M.; OLIVEIRA, J.E.; BARTOLINI, P.; SOARES, C.R.J.
First expression of the antagonist of mouse prolactin (S177D-mPRL) by adherent dhfr-CHO cell using p658 vector
2011 - SUZUKI, M.F.; ARTHUSO, F.S.; OLIVEIRA, J.E.; CAPONE, M.V.; DAMIANI, R.; OLIVEIRA, N.A.J.; GOULART RODRIGUES, H.; RIBELA, M.T.C.P.; SOARES, C.R.J.; BARTOLINI, P.
Two-step purification of mouse prolactin expressed in the periplasmic space of Escherichia coli
2010 - SUZUKI, MIRIAM F.; ARTHUSO, FERNANDA dos S.; SOUZA, JOSE M.; OLIVEIRA, JOAO E.; OLIVEIRA, TAIS L.; OLIVEIRA, NELIO A. de J.; GOULART, HERBERT R.; CAPONE, MARCOS V.N.; BARTOLINI, PAOLO; SOARES, CARLOS R.J.
Physico-chemical and biological characterization of glycosylated human prolactin produced at IPEN
2010 - GOULART, H.R.; ARTHUSO, F.S.; CAPONE, M.V.N.; OLIVEIRA, T.L.; OLIVEIRA, J.E.; SUZUKI, M.F.; SOUSA, J.M.; BARTOLINI, P.; SOARES, C.R.J.
Expression, purification, and characterization of a CHO-derived mouse prolactin receptor antagonist S177D-mPRL produced in serum-free medium
2012 - SUZUKI, M.F.; ARTHUSO, F.S.; OLIVEIRA, J.E; CAPONE, M.V.N.; OLIVEIRA, N.A.J.; RIBELA, M.T.C.P.; BARTOLINI, P.; SOARES, C.R.J.
Purification of glycosylated human prolactin from CHO cells adapted to serum-free suspension culture, by reverse=phase HPLC
2012 - CAPONE, M.V.N.; OLIVEIRA, J.E; ARTHUSO, F.S.; SUZUKI, M.F.; SILVA, A.B.; BARTOLINI, P.; SOARES, C.R.J.
Produção em escala laboratorial de prolactina humana em células CHO adaptadas para o crescimento em suspensão
2009 - ARTHUSO, FERNANDA dos S.; SUZUKI, MIRIAM F.; GOULART, HERBERT R.; SOUZA, JOSE M.; OLIVEIRA, JOAO E.; DAMIANI, RENATA; OLIVEIRA, TAIS L.; CAPONE, MARCOS V.N.; BARTOLINI, PAOLO; SOARES, CARLOS R.J.
O Grupo de Hormônios do Centro de Biotecnologia do IPEN tem desenvolvido várias linhagens de células de ovário de hamster chinês (CHO) modificadas geneticamente e comprovadamente eficientes na expressão de proteínas heterólogas, dentre elas a prolactina humana (hPRL). No entanto, todas as nossas linhagens são cultivadas aderidas e dependentes da presença de soro fetal bovino (SFB) no meiode cultivo para um crescimento eficiente. Nesse trabalho foi realizada a adaptação da nossa linhagem produtora de hPRL para o crescimento em suspensão e na ausência de SFB. As células em suspensão apresentam um grande interesse industrial-farmacêutico, tanto pela facilidade de cultivo e ampliação de escala, como pela produtividade volumétrica. Os estudos para adaptação dessas células foram realizados com base no protocolo descrito por Sinacore e colaboradores (2000). Desta forma foi realizada uma produção laboratorial de hPRL em frascos "spinner" por 30 dias consecutivos, assim com, a sua purificação e caracterização.
Influência de meios de cultivo comerciais na produção laboratorial de prolactina humana sintetizada por células CHO cultiadas em suspensão
2011 - ARTHUSO, FERNANDA dos S.; SUZUKI, MIRIAM F.; SOUZA, JOSE M.; OLIVEIRA, JOAO E.; CAPONE, MARCOS V.N.; BARTOLINI, PAOLO; SOARES, CARLOS R.J.
Expression, purification, and characterization of authentic mouse prolactin obtained in Escherichia coli periplasmic space
2012 - SUZUKI, MIRIAM F.; ARTHUSO, FERNANDA S.; OLIVEIRA, JOAO E.; OLIVEIRA, NELIO A.J.; GOULART, HERBERT R.; CAPONE, MARCOS V.N.; RIBELA, MARIA T.C.P.; BARTOLINI, PAOLO; SOARES, CARLOS R.J.
Enhancement of human prolactin synthesis by sodium butyrate addition to serum-free CHO cell culture
2010 - GOULART, HERBERT R.; ARTHUSO, FERNANDA dos S.; CAPONE, MARCOS V.N.; OLIVEIRA, TAIS L. de; BARTOLINI, PAOLO; SOARES, CARLOS R.J.
Sodium butyrate (NaBu) has been used as a productivity enhancer for the synthesis of recombinant proteins in Chinese hamster ovary (CHO) cells. Thus, the influence of NaBu on the production of recombinant human prolactin (hPRL) from CHO cells was investigated for the first time. CHO cell cultures were submitted to a treatment with different concentrations of NaBu (0.25 to 4 mM). Quantitative and qualitative analyses by reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) and Western blot or SDS-PAGE, carried out directly on CHO-conditioned medium, showed that the highest hPRL expression was obtained with 1 mM NaBu. In vitro biological assays based on noble rat lymphoma (Nb2) and mouse pro-B lymphoma (Ba/F3-LLP) cells were carried out on purified hPRL. Its bioactivity in the presence of NaBu was not apparently different from that of the First International Reference Reagent of recombinant hPRL (WHO 97/714). Our results show that NaBu increased the synthesis of recombinant hPRL in CHO cells, apparently without compromising either its structure or function.