REBECA DA SILVA CANTINHA
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Artigo IPEN-doc 23157 HSP70 expression in Biomphalaria glabrata snails exposed to cadmium2017 - CANTINHA, REBECA da S.; BORRELY, SUELI I.; OGUIURA, NANCY; PEREIRA, CARLOS A. de B.; RIGOLON, MARCELA M.; NAKANO, ELIANAIn this study, the effects of the heavy metal cadmium on the stress protein HSP70 are investigated in freshwater mollusks Biomphalaria glabrata. Adult snails were exposed for 96 h to CdCl2 at concentrations ranging from 0.09 to 0.7 mg L-1 (LC50/96 (h) = 0.34 (0.30-0.37). Time and concentration-dependent increases in the expression of HSP70 were observed at sub-lethal levels in the immunoblotting assay. Further, an increased survival to a lethal heat shock was observed in animals pre-exposed to a nonlethal concentration of cadmium, evidencing the induction of acquired tolerance. The present study demonstrated the inducibility of B. glabrata HSP70 by cadmium, a relevant environmental contaminant, at non-lethal levels, providing evidences that the assessment of HSP70 in B. glabrata can be regarded as a suitable biomarker for ecotoxicological studies.Artigo IPEN-doc 21211 Characterization of 'alfa'-fucosidase and other digestive hydrolases from Biomphalaria glabrata2015 - PERRELLA, NATALIA N.; CANTINHA, REBECA S.; NAKANO, ELIANA; LOPES, ADRIANA R.Artigo IPEN-doc 15152 Effects of high dose rate gamma radiation on survival and reproduction of Biomphalaria glabrata2009 - CANTINHA, REBECA S.; AMARAL, ADEMIR; BORRELY, SUELI I.; NAKANO, ELIANA; SILVA, LUANNA R.S.; MELO, ANA M.M.A.Ionizing radiations are known as mutagenic agents, causing lethality and infertility. This characteristic has motivated its application on animal biological control. In this context, the freshwater snail Biomphalaria glabrata can be considered an excellent experimental model to study effects of ionizing radiations on lethality and reproduction. This work was designed to evaluate effects of 60Co gamma radiation at high dose rate (10.04 kGy/h) on B. glabrata. For this purpose, adult snails were selected and exposed to doses ranging from 20 to 100 Gy, with 10 Gy intervals; one group was kept as control. There was not effect of dose rate in the lethality of gamma radiation; the value of 64,3 Gy of LD50 obtained in our study was similar to that obtained by other authors with low dose rates. Nevertheless, our data suggest that there was a dose rate effect in the reproduction. On all dose levels, radiation improved the production of embryos for all exposed individuals. However, viability indexes were below 6% and, even 65 days after irradiation, fertility was not recovered. These results are not in agreement with other studies using low dose rates. Lethality was obtained in all groups irradiated, and the highest doses presented percentiles of dead animals above 50%. The results demonstrated that doses of 20 and 30 Gy were ideal for population control of B. glabrata. Further studies are needed; nevertheless, this research evidenced great potential of high dose rate gamma radiation on B. glabrata reproductive control.Tese IPEN-doc 18589 Estudo da resposta do caramujo Biomphalaria glabrata (Say, 1818) frente a estímulos ambientais estressores, com enfoque na proteína HSP702012 - CANTINHA, REBECA da S.Moluscos têm sido empregados como bioindicadores em estudos de contaminação ambiental. Nesse contexto, o caramujo de água doce Biomphalaria glabrata tem sido avaliado como um bom modelo laboratorial, e estudos prévios apontaram sua aplicação na pesquisa ambiental. A proteína HSP70 é uma molécula de 70 kDa, pertencente a uma família de proteínas com papel na manutenção da homeostase dos seres vivos: as proteínas de choque térmico (HSPs); e vem sendo estudada como potencial biomarcador de dano ambiental, indicando estresse e protegendo os organismos dos danos às proteínas. Neste trabalho, foi caracterizada a proteína HSP70 de B. glabrata pelo Western blot, com o objetivo de seu emprego em aplicações ambientais futuras. Para isso, caramujos de 5-6 meses de idade, com diâmetro de concha de 14,4 (±1,7) mm, foram expostos ao calor e ao cloreto de cádmio (CdCl2) a fim de se verificar a resposta desta proteína frente a esses estresses. Os animais foram dissecados para investigação da indução da HSP70. As proteínas foram extraídas dos tecidos com tampão RIPA, separadas em eletroforese desnaturante em gel de poliacrilamida, transferidas para uma membrana de nitrocelulose e detectadas com anticorpo específico para HSP70. A CL50/96h foi determinada como sendo 0,34 (0,30-0,37) ppm para o CdCl2 e serviu de referência para os experimentos de indução da proteína. Foi observado que a exposição a temperaturas subletais aumentou a resistência dos caramujos à temperatura letal de 42 °C. Exposições prévias ao calor de 33 °C e ao CdCl2 a 0,22 ppm aumentou a sobrevivência dos caramujos B. glabrata à concentração letal de CdCl2 (0,7 ppm) e à temperatura letal (42 °C), respectivamente. Os achados do Western blot apontaram para um possível papel da HSP70 nesse processo. Os resultados mostraram relação entre a proteína HSP70 e o aumento na sobrevivência aos estímulos letais após prévia exposição a estresses moderados. O Western blot mostrou uma indução da HSP70 nos grupos pré-expostos, se comparados aos grupos controles. A glândula digestiva foi o tecido mais responsivo, no que concerne à indução da proteína HSP70, comparando com tecidos de cabeça/pé e ovoteste. Foi encontrado o pico de indução da HSP70 nos caramujos B. glabrata após 48 horas de exposição ao calor de 33 °C, e após 96 horas de exposição ao CdCl2 a 0,22 ppm. Apesar do bem conhecido papel da HSP70 na termotolerância e tolerância a outros agentes estressores nos organismos vivos, esta foi a primeira vez que isto foi demonstrado no B. glabrata, oferecendo subsídios para a sua aplicação em estudos de monitoramento ambiental. Os resultados apresentados aqui abrem o caminho para estudos futuros dessa proteína no molusco, e fornecem mais bases para o conhecimento do B. glabrata.