Ação do azul de metileno associado à luz de emissão vermelha em membrana reconstituída a partir de isolados de membrana de Leishmania amazonensis
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2020
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FÓRUM ON-LINE DE TECNOLOGIAS DA LUZ NA SAÚDE, 1st
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Resumo
INTRODUÇÃO: A leishmaniose é uma importante doença negligenciada
causada por protozoários do gênero Leishmania, que pode ser transmitida pela
picada de flebotomíneos. O tratamento convencional da leishmaniose envolve
o uso de fármacos que promovem efeitos clínicos adversos e resistência ao
tratamento. Assim, o desenvolvimento de novas técnicas para o tratamento
desta doença são cruciais. Recentemente, tem havido um interesse crescente
na aplicação de terapia fotodinâmica (PDT) na leishmaniose cutânea, que tem
mostrado bons resultados e parece ser bem tolerada pelos pacientes.
OBJETIVO: Desenvolver um protocolo para produzir vesículas gigantes de
membrana plasmática (GPMVs) a partir da membrana de promastigotas de
Leishmania amazonensis e verificar os efeitos da PDT mediada por azul de
metileno (AM) em GPMVs de L.amazonensis. METODOLOGIA: A extração da
membrana dos parasitas foi feita por centrifugações com diferentes gradientes
de sacarose. Dosagem de fosfato e proteína foi realizada para confirmar a
extração da membrana. As GPMVs foram então preparadas pela técnica de
eletroformação usando diferentes freqüências e tensões. As GPMVs
reconstituídas foram observadas em microscópio óptico invertido em contraste
de fase. Na sequência, as GPMVs foram diluídas em solução de glicose 0,2 M
contendo AM para uma concentração final de 50 μM. Em seguida, foram
acondicionadas em uma câmara de observação e levadas ao microscópio.A
irradiação foi feita com a lâmpada de mercúrio de 103 W do microscópio,
usando um filtro apropriado para a fotoativação do AM (lexc= 665 nm).
RESULTADOS: Foi observada perda de contraste da GPMV depois de 210 s
de exposição à luz devido à troca de solução interna (sacarose) e externa
(glicose), indicando formação de poros na vesícula. CONCLUSÃO: Nós fomos
capazes de desenvolver um protocolo para formação de GPMVs de L.
amazonensis, que mostraram poros após PDT, sugerindo alterações na
permeabilidade da membrana.
Como referenciar
DONATO, MARESSA; SAUTER, ISMAEL P.; CASADEI, BRUNA R.; ITRI, ROSANGELA; RIBEIRO, MARTHA S. Ação do azul de metileno associado à luz de emissão vermelha em membrana reconstituída a partir de isolados de membrana de Leishmania amazonensis. In: BAPTISTA, ALESSANDRA (ed.); NUNEZ, SILVIA C. (org.); BAPTISTA, ALESSANDRA (org.); GARCEZ, AGUINALDO (org.); SILVA, JULIANA P. (org.); SILVA, CAMILA R. (org.); CABRAL, FERNANDA V. (org.); YOSHIMURA, TANIA M. (org.); RIBEIRO, MARTHA S. (org.). In: FÓRUM ON-LINE DE TECNOLOGIAS DA LUZ NA SAÚDE, 1st, May 28-30, 2020, São Paulo, SP. Abstract... São Paulo, SP: Universidade Brasil, 2020. p. 12-12. Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/31540. Acesso em: 31 Dec 2025.
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